Detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal que viven en la región mediterránea
Extractos de un estudio de Maria-Dolores Tabar, Javier Tabar, Carolina Naranjo, Laura Altet y Xavier Roura de 2022
https://doi.org/10.1186/s13071-022-05205-x
Traducido y abreviado por Sven Jan Arndt
Introducción
La detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal que viven en la región mediterránea es fundamental para la salud y el bienestar de estos animales. Un examen y análisis exhaustivos pueden identificar posibles infecciones y permitir la implementación de medidas adecuadas para controlar la propagación de la enfermedad.
No debe subestimarse el papel de vectores como garrapatas o pulgas en la transmisión de patógenos a los perros. Estos diminutos parásitos pueden transmitir diversas enfermedades peligrosas, como la enfermedad de Lyme, la ehrlichiosis o la leishmaniasis. Por lo tanto, es importante desarrollar métodos de detección específicos para identificar estos patógenos en perros con rotura del ligamento cruzado craneal en la región mediterránea.
Un diagnóstico eficaz requiere una combinación de diferentes técnicas y pruebas. Estas incluyen, por ejemplo, pruebas serológicas, investigaciones moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y exámenes clínicos para identificar síntomas y signos de infección. Este enfoque integral permite un diagnóstico preciso y la instauración del tratamiento adecuado.
La detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal en la región mediterránea requiere una estrecha colaboración entre veterinarios, laboratorios e instituciones de investigación. Solo mediante esfuerzos conjuntos podremos profundizar nuestra comprensión de estas enfermedades, desarrollar medidas preventivas y mejorar la salud canina.
En general, la detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal en la región mediterránea sería un paso importante para contener la propagación de infecciones y garantizar el bienestar de los animales.
fondo
Rotura del ligamento cruzado craneal (CCLRLa rotura del ligamento pélvico es una causa común de cojera de las extremidades pélvicas en perros, generalmente debido a un proceso degenerativo que provoca la rotura del ligamento. Se han descrito varios factores de riesgo, como la edad, la raza, el sexo, la esterilización y el peso [1,2]. Sin embargo, es probable que CCLR tiene un origen multifactorial que involucra la genética, las características anatómicas y la inflamación articular crónica, que eventualmente conduce a la ruptura de ligamentos y osteoartritis [3, 4].
Se ha sugerido que mecanismos inmunopatológicos podrían estar involucrados en el desarrollo de lesiones degenerativas del LCC [5] y, además, la sinovitis linfoplasmocítica es un hallazgo común en perros con CCLR [6]. Por lo tanto, se han propuesto dos hipótesis sobre el papel de la sinovitis crónica en el desarrollo del daño de las fibras del ligamento cruzado y, en consecuencia, de la CCLR. La primera hipótesis plantea que la sinovitis es un evento casi primario que conduce a la destrucción progresiva de las fibras del ligamento [7].
La segunda razón es que varias publicaciones previas han reportado una mayor carga bacteriana en la membrana sinovial en biopsias de articulaciones de rodilla inflamadas de perros con CCLR en comparación con articulaciones de rodilla sanas, lo que sugiere que las bacterias ambientales podrían desencadenar sinovitis crónica persistente [8, 9]. Otros tipos de patógenos, como los patógenos transmitidos por vectores (VBP), pueden causar enfermedades articulares agudas y crónicas en perros, pero su papel en la CCLR aún no se ha investigado a fondo [10-14].
Un estudio reciente realizado en Brasil informó que 91,3 de 46 perros con leishmaniasis exhibieron anomalías articulares detectadas en el examen físico, radiografías y/o tomografía computarizada, pero la CCLR no se incluyó en la lista de anomalías articulares notificadas [14]. Otros parásitos asociados a la virulencia (VBP) como Ehrlichiacanis, Anaplasma phagocytophilum, Rickettsia rickettsii, Borrelia burgdorferi, Babesia canis, Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii y filarias también se han asociado con enfermedades articulares, como la poliartritis, en perros [4, 10, 15-24].
El objetivo de este estudio es detectar múltiples VBP en perros con CCLR, determinar si existe una correlación entre la presencia de VBP y CCLR e identificar la presencia de un patrón inflamatorio específico en la membrana sinovial de perros con CCLR y VBP.
métodos
Este fue un estudio prospectivo que incluyó 46 perros sometidos a tratamiento quirúrgico de CCLR y 16 perros de control sacrificados por afecciones articulares no relacionadas. Se tomaron muestras de sangre, líquido sinovial y una biopsia de la membrana sinovial.
Las pruebas de patógenos incluyeron serología para Leishmania infantum (ELISA cuantitativo), Ehrlichiacanis/ewingii, Borrelia burgdorferi, Anaplasma phagocytophilum/platys y Dirofilaria immitis (prueba 4DX IDEXX), así como PCR para L. infantum, Ehrlichia/Anaplasma spp., Bartonella spp., piroplasmas (Babesia spp. y Theileria spp.) y filarias (D. immitis, Dirofilaria repens, Acanthocheilonema dracunculoides, Acanthocheilonema reconditum y Cercopithifilaria spp.) en muestras de sangre completa (BE) con EDTA y líquido sinovial (LS). También se realizó citología del LS y una evaluación histopatológica de la membrana sinovial.
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Resultados
El estudio incluyó 62 perros, 46 con CCLR y 16 perros de control. Veinticinco hembras (17 intactas y ocho esterilizadas) y 21 machos (15 intactos y seis castrados) de entre 6 meses y 11 años de edad presentaban CCLR. Se representaron dieciséis razas diferentes, siendo las mestizas las más comunes (n = 18). El grupo de control estuvo compuesto por ocho hembras (cuatro intactas y cuatro esterilizadas) y ocho machos (seis intactos y dos castrados) de entre 4 y 17 años de edad, pertenecientes a 10 razas diferentes (Suplemento 1: Tabla S1).
Las razones para la eutanasia incluyeron neoplasias (cinco), insuficiencia renal crónica (dos), dilatación-vólvulo gástrico (uno), hiperdrenocorticismo hipofisario (uno), hernia de disco (dos), obstrucción uretral (uno), insuficiencia cardíaca (dos), epilepsia refractaria (uno) e insuficiencia hepática aguda (uno).
Ninguno de los perros incluidos en este estudio presentó antecedentes clínicos, signos clínicos ni anomalías clinicopatológicas sugestivas de infección por VBP. La prevalencia de VBP en el grupo CCLR fue de 19,6 % (9/46). Se detectó Leishmania infantum en seis perros: tres seropositivos, uno positivo en la PCR en sangre (SF-PCR) y dos seropositivos y positivos en la PCR en sangre (SF-PCR). Se detectaron especies de Ehrlichia en tres perros: dos seropositivos y uno seropositivo y positivo en la PCR en sangre (E. canis).
Uno de estos perros fue coinfectado con L. infantum (positivo por PCR en sangre) y Ehrlichia spp. (seropositivo). Finalmente, se detectó ADN de Theileria equi en la muestra de sangre de un perro (Archivo Suplementario 2: Tabla S2). En el grupo control, la prevalencia de VBP en perros fue de 18,8 % (3/16). Los tres perros dieron positivo para L. infantum: uno seropositivo, uno positivo por PCR en sangre y otro positivo por PCR en sangre y sangre de un perro (Archivo Suplementario 2: Tabla S2). No se detectó VBP mediante microscopía óptica en un frotis de SF de uno de los perros incluidos en este estudio, y la prevalencia general de VBP no difirió estadísticamente entre los perros con CCLR y los perros de control [odds ratio (OR) = 0,949, intervalo de confianza (IC) 95% 0,22-4,05, P = 0,629].
Se encontró CCLR unilateral en 29 perros (cinco de los cuales tenían VBP), mientras que se observó CCLR bilateral en 17 perros (cuatro de los cuales tenían VBP), lo que significa que la presencia de CCLR bilateral no fue estadísticamente más frecuente en perros con VBP (OR = 0,677, IC 0,15-2,97, P = 0,439). El examen histopatológico de las biopsias de la membrana sinovial reveló sinovitis con diversos patrones inflamatorios, incluyendo linfoplasmocítica (17), neutrofílica (1), granulomatosa (1) y mixta linfoplasmocítica y granulomatosa (2), en 45,6 (21/46) de los perros con CCLR; y en 43,7 (7/16) de los perros de control, todos los cuales tenían infiltración linfoplasmocítica.
La presencia de sinovitis no fue estadísticamente más frecuente en perros con CCLR en comparación con los perros control (χ² = 0,017, gl = 1, P = 0,895) o en perros con o sin VBP (χ² = 0,141, gl = 1, P = 0,708). Además, no se observó un patrón inflamatorio distintivo o específico en perros con VBP, independientemente de si tenían CCLR o eran perros control (Archivo adicional 2: Tabla S2). Al revisar los resultados de perros VBP-positivos con CCLR, dos de cada tres perros que fueron L. infantum PCR-positivos pero sin antecedentes clínicos previos o diagnóstico de infección por Leishmania desarrollaron signos clínicos sugestivos de leishmaniasis activa entre 9 y 12 meses después de la cirugía de CCLR (Archivo adicional 2: Tabla S2).
discusión
Este estudio no logró demostrar un papel para la VBP en la CCLR o la presencia de un patrón específico de inflamación articular en perros VBP-positivos, aunque varias enfermedades transmitidas por vectores en perros se han asociado con daño articular [4, 10, 14, 16-22, 24] y algunas de ellas, particularmente la leishmaniasis, se consideran endémicas en el área donde se realizó el presente estudio [28].
Probablemente se necesitarían estudios de casos y controles más amplios para aclarar el papel de diferentes organismos transmitidos por vectores como causa o cofactor en el desarrollo de CCLR. En la leishmaniasis canina, se ha reportado que la incidencia de problemas ortopédicos oscila entre 44,8 µg/ml y 91,3 µg/ml al combinarse la exploración ortopédica con la imagenología (radiología o tomografía computarizada) para buscar anomalías articulares [14, 29]. Las anomalías identificadas en la exploración ortopédica incluyen rigidez articular, cojera, inflamación de tejidos blandos, dolor articular o crepitación y deterioro funcional.
Los perros con CCLR pueden presentar una o más de estas anomalías ortopédicas descritas, pero estudios previos no han aportado información específica sobre la prevalencia de CCLR en perros con leishmaniasis. En teoría, la cojera en la leishmaniasis podría deberse a poliartritis con afectación ósea o muscular adicional, generalmente secundaria a la inflamación asociada al depósito de inmunocomplejos en la articulación debido a una reacción de hipersensibilidad de tipo III [4, 12, 30].
Sin embargo, también puede producirse una infección articular primaria, y los parásitos se han identificado en macrófagos mediante examen citológico del líquido sinovial y mediante examen histológico de las membranas sinoviales [31, 32]. Por lo tanto, los perros infectados pueden presentar monoartritis, oligoartritis o poliartritis [18], y según algunos informes, la articulación de la rodilla puede verse afectada en casi el 80% de los casos [14]. En este estudio, L. infantum fue el parásito venéreo más común detectado en perros con disfunción renal pulmonar crónica (LRCC), aunque su prevalencia no difirió significativamente de la de los perros de control, lo que sugiere que la leishmaniasis no desempeña un papel en la patogénesis de la LRCC.
Una posible explicación para la detección en ambos grupos de perros podría ser la alta prevalencia de infección subclínica en un área endémica de leishmaniasis [28, 33].
Se ha descrito previamente una asociación entre poliartritis y ehrlichiosis; sin embargo, no se encontraron pruebas claras y no se descartaron otras posibles coinfecciones, por lo que la asociación fue controvertida [10, 15-17]. En el presente estudio, se detectaron anticuerpos o ADN de Ehrlichia en tres perros con CCLR. Sin embargo, no se pudo confirmar la infección en los dos únicos perros seropositivos, posiblemente debido a la exposición o a una infección previa. En el tercer perro, seropositivo y con PCR positiva para E. canis, no se observaron otros signos clínicos ni anomalías de laboratorio indicativas de ehrlichiosis, ya sea manifiesta o subclínica, antes o después de la cirugía de CCLR.
Esto podría indicar que el perro se encontraba en una fase aguda de la enfermedad y se recuperó espontáneamente, o que se encontraba en una fase subclínica. Ambos escenarios probablemente descartan una asociación entre la CCLR y la infección por Ehrlichia. Theileria equi es uno de los piroplasmas equinos enzoóticos en España, y casi la mitad de los caballos presentan anticuerpos o parasitemia circulante [34].
Este parásito se ha detectado ocasionalmente en perros, pero se desconoce su importancia epidemiológica y clínica [35]. Todo esto, y el hecho de que el perro de este estudio con T. equi en SF no presentara otras anomalías clinicopatológicas durante el período de estudio, podría indicar que este patógeno era oportunista y carecía de importancia clínica para la CCLR.
Aunque Bartonella, A. phagocytophilum, B. burgdorferi, Filarias u otros piroplasmas como Babesia se han asociado con poliartritis canina aguda o crónica [10, 13, 17, 19-22, 36], ningún perro de este estudio dio positivo para ninguno de estos patógenos. Estos resultados podrían ser consistentes con la prevalencia geográfica local de estas VBP identificadas en estudios previos en el área investigada en este estudio [16, 27, 34, 37].
Sin embargo, cabe señalar que la limitada sensibilidad de las técnicas empleadas y las limitaciones asociadas con las muestras tomadas para el análisis también podrían haber contribuido a la imposibilidad de detectar estos organismos. La artritis linfoplasmocítica fue el hallazgo histopatológico más frecuente en este estudio, tanto en perros con CCLR como sin CCLR. Esto concuerda con publicaciones previas en las que la sinovitis linfoplasmocítica se describió con frecuencia en perros con CCLR [6], pero también se ha detectado en muestras post mortem de perros sin CCLR [7].
Por otro lado, la artritis reactiva inmunomediada es predominantemente neutrofílica debido al depósito de complejos inmunes desarrollados tras la infección por VBP [4, 11, 12, 18, 29]. Este hecho respalda la idea de que la VBP no influye en la patogénesis de la CCLR, junto con el hecho de que ni el patrón inflamatorio ni la frecuencia de sinovitis difirieron estadísticamente entre perros con o sin CCLR o entre perros con o sin VBP en este estudio.
Aunque no estadísticamente significativo, tres perros con CCLR en este estudio presentaron sinovitis granulomatosa. Este tipo de inflamación también se ha observado en varios tejidos de pacientes con leishmaniasis [33, 38], pero solo uno de ellos dio positivo para leishmaniasis. Si bien la inflamación granulomatosa suele asociarse con la presencia de Leishmania en el tejido [12, 13], no se detectaron amastigotes en este perro seropositivo y positivo para Leishmania por PCR con sinovitis granulomatosa.
La causa de la inflamación granulomatosa en los otros dos perros sigue siendo incierta. Por lo tanto, el presente estudio no pudo descartar definitivamente un posible papel de estas VBP en la patogénesis de la sinovitis y quizás también de la CCLR en algunos de estos perros. Este estudio presenta algunas limitaciones. El pequeño número de perros incluidos, debido a las dificultades para reclutar casos debido a los estrictos criterios de inclusión y al hecho de que se trató de un estudio prospectivo con un grupo control, implica que los resultados estadísticos deben interpretarse con cautela.
Además, solo se incluyeron perros sometidos a tratamiento quirúrgico para CCLR, excluyendo así a los perros diagnosticados inicialmente con VBP y CCLR que finalmente no se sometieron a cirugía. Otra limitación fue la amplia gama de enfermedades que llevaron a la eutanasia de los perros de control y el hecho de que no se evaluaron las superficies articulares, especialmente dada la mayor edad promedio de la población de control.
Sin embargo, se revisó exhaustivamente el historial médico para descartar infecciones previas por el virus del papiloma de perfusión venosa eosinofílico (EVPP) o enfermedades que pudieran afectar las articulaciones. Además, los perros control fueron examinados durante el mismo período y en la misma zona que los perros con CCLR, por lo que la probabilidad de detección de VBP no se vio significativamente afectada. La última limitación se centró en la detección de VBP. En este estudio, se utilizaron serología, microscopía en citología de células escamosas y biopsia de membrana sinovial, así como PCR en sangre y células escamosas para maximizar la probabilidad de detección de VBP.
Sin embargo, los resultados serológicos positivos no demostraron causalidad de las anomalías observadas en la articulación. Además, no fue posible realizar pruebas serológicas para todos los patógenos investigados, ni realizar inmunohistoquímica ni PCR en la biopsia para aumentar la probabilidad de detectar VBP seleccionadas.
Conclusiones
Este estudio no demostró la función de diferentes VBP en la patogénesis de la CCLR en perros, ni confirmó la presencia o un patrón diferente de inflamación articular en perros positivos al patógeno. Sin embargo, para superar las limitaciones de este estudio, se requieren más investigaciones para aclarar la posible relación entre la VBP y la CCLR en perros.
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