Detekcija vektorskih patogena u pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta koji žive u mediteranskoj regiji
Izvodi iz studije Marije-Dolores Tabar, Javiera Tabara, Caroline Naranjo, Laure Altet i Xaviera Roure iz 2022.
https://doi.org/10.1186/s13071-022-05205-x
Preveo i skratio Sven Jan Arndt
Uvod
Detekcija vektorskih patogena kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta koji žive u mediteranskoj regiji od velike je važnosti za zdravlje i dobrobit tih životinja. Temeljit pregled i analiza mogu identificirati potencijalne infekcije i omogućiti provedbu odgovarajućih mjera za kontrolu širenja bolesti.
Ne treba podcijeniti ulogu vektora, poput krpelja ili buha, u prenošenju patogena na pse. Ovi sitni paraziti mogu prenositi razne opasne bolesti, poput lajmske bolesti, erlihioze ili lišmanioze. Stoga je važno razviti specifične metode detekcije kako bi se identificirali ovi patogeni kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta u mediteranskoj regiji.
Učinkovita dijagnoza zahtijeva kombinaciju različitih tehnika i testova. To uključuje, na primjer, serološke testove, molekularna istraživanja poput lančane reakcije polimeraze (PCR) i kliničke preglede za identifikaciju simptoma i znakova infekcije. Ovaj sveobuhvatni pristup omogućuje točnu dijagnozu i početak odgovarajućeg liječenja.
Otkrivanje vektorskih patogena kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta u mediteranskoj regiji zahtijeva blisku suradnju između veterinara, laboratorija i istraživačkih institucija. Samo zajedničkim naporima možemo produbiti naše razumijevanje ovih bolesti, razviti preventivne mjere i poboljšati zdravlje pasa.
Sveukupno, otkrivanje vektorskih patogena kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta u mediteranskoj regiji bio bi važan korak u suzbijanju širenja infekcija i osiguravanju dobrobiti životinja.
pozadina
Ruptura kranijalnog križnog ligamenta (CCLRRuptura zdjeličnog ligamenta čest je uzrok hromosti zdjeličnih udova kod pasa, najčešće zbog degenerativnog procesa koji dovodi do rupture ligamenta. Opisano je nekoliko čimbenika rizika, kao što su dob, pasmina, spol, status kastracije i težina [1,2]. Međutim, vjerojatno je da CCLR ima multifaktorijalno podrijetlo koje uključuje genetiku, anatomske značajke i kroničnu upalu zglobova, što na kraju dovodi do rupture ligamenata i osteoartritisa [3, 4].
Sugerirano je da imunopatološki mehanizmi mogu biti uključeni u razvoj degenerativnih lezija križnog ligamenta [5], a nadalje, limfoplazmocitni sinovitis je čest nalaz kod pasa s CCLR-om [6]. Stoga su predložene dvije hipoteze o ulozi kroničnog sinovitisa u razvoju oštećenja vlakana križnog ligamenta i, posljedično, CCLR-a. Prva hipoteza navodi da je sinovitis gotovo primarni događaj koji dovodi do progresivnog uništavanja vlakana ligamenta [7].
Drugi razlog je taj što je nekoliko prethodnih publikacija izvijestilo o povećanom bakterijskom opterećenju sinovijalne membrane u biopsijama upaljenih koljenskih zglobova kod pasa s CCLR-om u usporedbi sa zdravim koljenskim zglobovima, što sugerira da bakterije iz okoliša mogu izazvati perzistentni kronični sinovitis [8, 9]. Druge vrste patogena, poput vektorskih patogena (VBP), mogu uzrokovati akutne i kronične bolesti zglobova kod pasa, ali njihova uloga u CCLR-u još nije temeljito istražena [10-14].
Nedavna studija provedena u Brazilu izvijestila je da je 91,3 od 46 pasa s lišmanijom pokazalo abnormalnosti zglobova otkrivene fizikalnim pregledom, radiografijama i/ili kompjuteriziranom tomografijom, ali CCLR nije bio uključen na popis prijavljenih abnormalnosti zglobova [14]. Drugi paraziti povezani s virulencijom (VBP) poput Ehrlichiacanis, Anaplasma phagocytophilum, Rickettsia rickettsii, Borrelia burgdorferi, Babesia canis, Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii i filarija također su povezani s bolestima zglobova, poput poliartritisa, kod pasa [4, 10, 15-24].
Cilj ovog istraživanja je otkriti više VBP-ova u pasa s CCLR-om, utvrditi postoji li korelacija između prisutnosti VBP-a i CCLR-a te identificirati prisutnost specifičnog upalnog obrasca u sinovijalnoj membrani pasa s CCLR-om i VBP-om.
Metode
Ovo je bila prospektivna studija u koju je uključeno 46 pasa kojima je predloženo kirurško liječenje CCLR-a i 16 kontrolnih pasa koji su eutanazirani zbog nepovezanih stanja zglobova. Prikupljeni uzorci uključivali su krv, sinovijalnu tekućinu i biopsiju sinovijalne membrane.
Testiranje patogena uključivalo je serologiju za Leishmania infantum (kvantitativni ELISA), Ehrlichiacanis/ewingii, Borrelia burgdorferi, Anaplasma phagocytophilum/platys i Dirofilaria immitis (4DX IDEXX test), kao i PCR za L. infantum, Ehrlichia/Anaplasma spp., Bartonella spp., piroplazme (Babesia spp. i Theileria spp.) i filarije (D. immitis, Dirofilaria repens, Acanthocheilonema dracunculoides, Acanthocheilonema reconditum i Cercopithifilaria spp.) u uzorcima pune krvi (EB) s EDTA-om i sinovijalne tekućine (SF). Također su provedeni citologija SF-a i histopatološka evaluacija sinovijalne membrane.
Ovdje saznajte sve o 5 modernih kirurških metoda za rupture križnih ligamenata.
Rezultati
U studiju je uključeno 62 psa, 46 s CCLR-om i 16 kontrolnih pasa. Dvadeset pet ženki (17 intaktnih i osam steriliziranih) i 21 mužjak (15 intaktnih i šest kastriranih) u dobi od 6 mjeseci do 11 godina bili su pogođeni CCLR-om. Zastupljeno je šesnaest različitih pasmina, s najčešćim mješancima (n = 18). Kontrolna skupina sastojala se od osam ženki (četiri intaktne i četiri sterilizirane) i osam mužjaka (šest intaktnih i dva kastrirana) u dobi od 4 do 17 godina, koji su predstavljali 10 različitih pasmina (Dodatak 1: Tablica S1).
Razlozi za eutanaziju uključivali su neoplazme (pet), kronično zatajenje bubrega (dva), dilataciju-volvulus želuca (jedan), hipereraderenokorticizam hipofize (jedan), herniju diska (dva), opstrukciju uretre (jedan), zatajenje srca (dva), refraktornu epilepsiju (jedna) i akutno zatajenje jetre (jedno).
Nijedan od pasa uključenih u ovu studiju nije imao kliničku anamnezu, kliničke znakove ili kliničkopatološke abnormalnosti koje ukazuju na VBP infekciju. Prevalencija VBP-a u CCLR skupini bila je 19,6 % (9/46). Leishmania infantum otkrivena je kod šest pasa, od kojih su tri bila seropozitivna, jedan SF-PCR-pozitivan, a dva su bila i seropozitivna i SF-PCR-pozitivna. Ehrlichia spp. otkrivene su kod tri psa, od kojih su dva bila seropozitivna, a jedan seropozitivan i PCR-pozitivan u krvi (E. canis).
Jedan od ovih pasa bio je koinficiran s L. infantum (SF-PCR pozitivan) i Ehrlichia spp. (seropozitivan). Konačno, DNK Theileriaequi otkrivena je u SF uzorku jednog psa (Dodatna datoteka 2: Tablica S2). U kontrolnoj skupini, prevalencija VBP-a kod pasa bila je 18,8 % (3/16). Sva tri psa bila su pozitivna na L. infantum, jedan seropozitivan, jedan pozitivan na PCR krvi i jedan seropozitivan te pozitivan i na PCR krvi i na SF (Dodatna datoteka 2: Tablica S2). VBP nije otkriven svjetlosnom mikroskopijom u SF razmazu jednog od pasa uključenih u ovu studiju, a ukupna prevalencija VBP-a nije se statistički razlikovala između pasa s CCLR-om i kontrolnih pasa [Omjer šansi (OR) = 0,949, 95% interval pouzdanosti (CI) 0,22-4,05, P = 0,629].
Jednostrani CCLR pronađen je kod 29 pasa (od kojih je pet imalo VBP), dok je bilateralni CCLR uočen kod 17 pasa (od kojih su četiri imala VBP), što znači da prisutnost bilateralnog CCLR-a nije bila statistički češća kod pasa s VBP-om (OR = 0,677, CI 0,15–2,97, P = 0,439). Histopatološki pregled biopsija sinovijalne membrane otkrio je sinovitis s različitim upalnim obrascima, uključujući limfoplazmocitni (17), neutrofilni (1), granulomatozni (1) i miješani limfoplazmocitni i granulomatozni (2), kod 45,6 (21/46) pasa s CCLR-om; i kod 43,7 (7/16) kontrolnih pasa, od kojih su svi imali limfoplazmocitnu infiltraciju.
Prisutnost sinovitisa nije bila statistički češća kod pasa s CCLR-om u usporedbi s kontrolnim psima (χ² = 0,017, df = 1, P = 0,895) ili kod pasa sa ili bez VBP-a (χ² = 0,141, df = 1, P = 0,708). Nadalje, nije uočen nikakav zaseban ili specifičan upalni obrazac kod pasa s VBP-om, bez obzira na to jesu li imali CCLR ili su bili kontrolni psi (Dodatna datoteka 2: Tablica S2). Prilikom pregleda ishoda VBP-pozitivnih pasa s CCLR-om, dva od tri psa koji su bili L. infantum PCR-pozitivni, ali bez prethodne kliničke anamneze ili dijagnoze infekcije Leishmania-om razvili su kliničke znakove koji ukazuju na aktivnu lišmaniju između 9 i 12 mjeseci nakon operacije CCLR-a (Dodatna datoteka 2: Tablica S2).
rasprava
Ova studija nije uspjela pokazati ulogu VBP-a u CCLR-u ili prisutnost specifičnog obrasca upale zglobova kod VBP-pozitivnih pasa, iako je nekoliko vektorskih bolesti kod pasa povezano s oštećenjem zglobova [4, 10, 14, 16-22, 24], a neke od njih, posebno lišmanijaza, smatraju se endemskima u području gdje je provedena ova studija [28].
Vjerojatno bi bile potrebne veće studije slučaj-kontrola kako bi se razjasnila uloga različitih vektorskih organizama kao uzroka ili kofaktora u razvoju CCLR-a. Kod pseće lišmanioze, zabilježena je incidencija ortopedskih problema u rasponu od 44,8 % do 91,3 % kada su kombinirani ortopedski pregled i snimanje (radiologija i/ili kompjuterizirana tomografija) kako bi se tražile abnormalnosti zglobova [14, 29]. Abnormalnosti utvrđene ortopedskim pregledom uključuju ukočenost zglobova, hromost, oticanje mekog tkiva, bol u zglobovima ili krepitus i funkcionalno oštećenje.
Psi s CCLR-om mogu pokazivati jednu ili više od ovih opisanih ortopedskih abnormalnosti, ali prethodne studije nisu pružile specifične informacije o prevalenciji CCLR-a kod pasa koji pate od lišmanijaze. Teoretski, hromost kod lišmanijaze mogla bi biti uzrokovana poliartritisom s dodatnim zahvaćanjem kostiju ili mišića, obično sekundarno upalom povezanom s taloženjem imunoloških kompleksa u zglobu zbog reakcije preosjetljivosti tipa III [4, 12, 30].
Međutim, može se pojaviti i primarna infekcija zgloba, a paraziti su identificirani u makrofagima citološkim pregledom sinovijalne tekućine i histološkim pregledom sinovijalnih membrana [31, 32]. Dakle, zaraženi psi mogu pokazivati monoartritis, oligoartritis ili poliartritis [18], a prema nekim izvješćima, koljeni zglob može biti zahvaćen u gotovo 80% slučajeva [14]. U ovoj studiji, L. infantum bio je najčešći venerični parazit otkriven kod pasa s kroničnom plućnom disfunkcijom bubrega (CCLR), iako se njegova prevalencija nije značajno razlikovala od prevalencije kontrolnih pasa, što sugerira da lišmanijaza ne igra ulogu u patogenezi CCLR.
Jedno moguće objašnjenje za otkrivanje u obje skupine pasa mogla bi biti visoka prevalencija subkliničke infekcije u endemskom području lišmanijaze [28, 33].
Povezanost između poliartritisa i erlihioze već je ranije zabilježena; međutim, nije bilo jasnih dokaza, a druge moguće koinfekcije nisu bile isključene, pa je povezanost bila kontroverzna [10, 15-17]. U ovoj studiji, antitijela ili DNA Ehrlichia otkriveni su kod tri psa s CCLR-om. Međutim, infekcija nije mogla biti potvrđena kod jedina dva seropozitivna psa, moguće jednostavno zbog izloženosti ili prethodne infekcije. Kod trećeg psa, koji je bio seropozitivan i PCR-pozitivan na E. canis, prije ili nakon CCLR operacije nisu bili prisutni drugi klinički znakovi ili laboratorijske abnormalnosti koje bi ukazivale na očitu ili subkliničku erlihiozu.
To bi moglo ukazivati na to da je pas bio ili u akutnoj fazi bolesti i spontano se oporavio ili da je bio u subkliničkoj fazi. Oba scenarija vjerojatno isključuju povezanost između CCLR-a i infekcije Ehrlichiom. Theileria equi je jedna od konjskih piroplazmi koja je enzootska u Španjolskoj, s gotovo polovicom konja koja pokazuje antitijela ili cirkulirajuću parazitemiju [34].
Ovaj parazit je povremeno otkriven kod pasa, ali njegov epidemiološki i klinički značaj ostaje nepoznat [35]. Sve to, i činjenica da pas u ovoj studiji s T. equi u SF nije pokazao druge kliničkopatološke abnormalnosti tijekom cijelog razdoblja istraživanja, moglo bi ukazivati na to da je ovaj patogen bio oportunistički i da nije imao klinički značaj za CCLR.
Iako su Bartonella, A. phagocytophilum, B. burgdorferi, Filariae ili druge piroplazme poput Babesia povezane s akutnim ili kroničnim poliartritisom pasa [10, 13, 17, 19-22, 36], niti jedan pas u ovoj studiji nije bio pozitivan na bilo koji od ovih patogena. Ovi rezultati mogu biti u skladu s lokalnom geografskom prevalencijom ovih VBP-ova identificiranih u prethodnim studijama na području istraživanom u ovoj studiji [16, 27, 34, 37].
Međutim, treba napomenuti da ograničena osjetljivost korištenih tehnika i ograničenja povezana s uzorcima uzetim za pregled također mogu doprinijeti neuspjehu u otkrivanju ovih organizama. Limfoplazmacitni artritis bio je najčešći histopatološki nalaz u ovoj studiji, i kod pasa sa i bez CCLR-a. To je u skladu s prethodnim publikacijama u kojima je limfoplazmacitni sinovitis često opisan kod pasa s CCLR-om [6], ali je također otkriven u postmortalnim uzorcima pasa bez CCLR-a [7].
S druge strane, reaktivni imunološki posredovani artritis je pretežno neutrofilni zbog taloženja razvijenih imunoloških kompleksa nakon infekcije VBP-om [4, 11, 12, 18, 29]. Ova činjenica podupire ideju da VBP ne igra ulogu u patogenezi CCLR-a, zajedno s činjenicom da se ni upalni obrazac ni učestalost sinovitisa nisu statistički razlikovali između pasa sa ili bez CCLR-a ili između pasa sa ili bez VBP-a u ovoj studiji.
Iako nije statistički značajno, tri psa s CCLR-om u ovoj studiji pokazala su granulomatozni sinovitis. Ova vrsta upale također je uočena u nekoliko tkiva pacijenata s lišmanijom [33, 38], ali samo je jedan od njih bio pozitivan na lišmaniju. Iako je granulomatozna upala obično povezana s prisutnošću lišmanije u tkivu [12, 13], kod ovog seropozitivnog i PCR-pozitivnog psa s granulomatoznim sinovitisom nisu mogli biti otkriveni amastigoti.
Uzrok granulomatozne upale kod druga dva psa ostaje nejasan. Stoga, trenutna studija nije mogla definitivno isključiti moguću ulogu ovih VBP-ova u patogenezi sinovitisa, a možda i CCLR-a kod nekih od ovih pasa. Ova studija ima neka ograničenja. Mali broj uključenih pasa, zbog poteškoća u regrutiranju slučajeva zbog strogih kriterija uključivanja i činjenice da se radilo o prospektivnoj studiji s kontrolnom skupinom, znači da statističke rezultate treba tumačiti s oprezom.
Nadalje, uključeni su samo psi koji su podvrgnuti kirurškom liječenju CCLR-a, čime su isključeni psi kojima je u početku dijagnosticiran VBP i CCLR koji na kraju nisu podvrgnuti operaciji. Još jedno ograničenje bio je širok raspon bolesti koje su dovele do eutanazije kontrolnih pasa i činjenica da zglobne površine nisu procijenjene, posebno s obzirom na višu prosječnu dob kontrolne populacije.
Međutim, medicinska anamneza je temeljito pregledana kako bi se isključile prethodne infekcije eozinofilnim venskim perfuzijskim papiloma virusom (EVPP) ili bolesti koje bi mogle utjecati na zglobove. Nadalje, kontrolni psi su pregledani u istom vremenskom razdoblju i na istom području kao i psi iz skupine CCLR, tako da vjerojatnost otkrivanja VBP-a nije bila značajno utjecana. Konačna ograničenost odnosila se na otkrivanje VBP-a. U ovoj studiji koristili smo serologiju, mikroskopiju u citologiji pločastih stanica i biopsiju sinovijalne membrane, kao i PCR u krvi i pločastim stanicama kako bismo maksimizirali vjerojatnost otkrivanja VBP-a.
Međutim, pozitivni serološki rezultati nisu dokazali uzročnost s uočenim abnormalnostima u zglobu. Nadalje, nije bilo moguće provesti serološko testiranje za sve ispitivane patogene, niti se imunohistokemija i/ili PCR mogli provesti na biopsiji kako bi se povećala vjerojatnost otkrivanja odabranih VBP-ova.
Zaključci
Ova studija nije uspjela pokazati ulogu različitih VBP-ova u patogenezi CCLR-a kod pasa, niti je potvrdila prisutnost ili drugačiji obrazac upale zglobova kod pasa pozitivnih na patogene. Međutim, kako bi se prevladala ograničenja ove studije, možda će biti potrebna daljnja istraživanja kako bi se razjasnila potencijalna veza između VBP-a i CCLR-a kod pasa.
Ovdje saznajte sve o 5 modernih kirurških metoda za rupture križnih ligamenata.
Izvori
1. Brioschi V, Arthurs GI. Ruptura kranijalnog križnog ligamenta u malih pasa (<15 kg): narativni pregled literature. J Small Anim Pract. 2021;62:1037–50.
2. Gilbert S, Langenbach A, Marcellin-Little DJ, Pease AP, Ru H. Osteoartritis koljenog zgloba u vrijeme dijagnoze ozljede kranijalnog križnog ligamenta je veći kod boksera i pasa težih od 35 kilograma. Vet Radiol Ultrasound. 2019;60:280–8.
3. Comerford EJ, Smith K, Hayashi K. Ažuriranje etiopatogeneze bolesti kranijalnog križnog ligamenta kod pasa. Vet Comp Orthop Traumatol. 2011;24:91–8.
4. Bennett D. Imunološki posredovani i zarazni artritis. U: Ettinger SJ, Feldman EC, urednici. Textb Vet Intern Med Dis Dog Cat. 7. izd. Missouri: Saunders; 2010. str. 743–9.
5. Doom M, de Bruin T, de Rooster H, van Bree H, Cox E. Imunopatološki mehanizmi u pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta. Vet Immunol Immunopathol. 2008;125:143–61.
6. Erne JB, Goring RL, Kennedy FA, Schoenborn WC. Prevalencija limfoplazmocitnog sinovitisa u pasa s prirodno nastalom rupturom kranijalnog križnog ligamenta. J Am Vet Med Assoc. 2009;235:386–90.
7. D.ring AK, Junginger J, Hewicker-Trautwein M. Degeneracija križnog ligamenta i sinovitis koljenog zgloba u 56 pasa s intaktnim kranijalnim križnim ligamentima: korelacija histoloških nalaza i broja te fenotipova upalnih stanica s dobi, tjelesnom težinom i pasminom. Vet Immunol Immunopathol. 2018;196:5–13.
8. Muir P, Oldenhoff WE, Hudson AP, Manley PA, Schaefer SL, Markel MD, et al. Detekcija DNA iz niza bakterijskih vrsta u koljenskim zglobovima pasa s upalnim artritisom koljena i povezanom degenerativnom rupturom prednjeg križnog ligamenta. Microb Pathog. 2007;42:47–55.
9. Schwartz Z, Zitzer NC, Racette MA, Manley PA, Schaefer SL, Markel MD, et al. Jesu li bakterijsko opterećenje i sinovitis povezani kod pasa s upalnim artritisom koljena? Vet Microbiol. 2011;148:308–16.
10. Foley J, Drazenovich N, Leutenegger CM, Chomel BB. Povezanost između poliartritisa i trombocitopenije te povećana prevalencija vektorskih patogena u kalifornijskih pasa. Vet Rec. 2007;160:159–62.
11. Stull JW, Evason M, Carr AP, Waldner C. Imunološki posredovani poliartritis kod pasa: klinički i laboratorijski nalazi u 83 slučaja u zapadnoj Kanadi (1991. – 2001.). Can Vet J. 2008.;49:1195–203.
12. Day MJ. Imunopatologija vektorskih bolesti pasa. Vektori parazita. 2011.;4:48.
13. Koutinas AF, Koutinas CK. Patološki mehanizmi koji leže u osnovi kliničkih nalaza kod pasa s lišmanijom uzrokovanom Leishmania infantum/chagasi. Vet Pathol. 2014;51:527–38.
14. Silva ARS, Oliveira HS, Gomes AAD, Beserra HEO, Silva JP, Santos-Doni TR, et al. Zahvaćenost zglobova kod visceralne lišmanioze kod pasa: ortopedski fizikalni pregled, radiografski i kompjuterizirani tomografski nalazi. Vet Parasitol. 2021;299:109569.
15. Bellah JR, Shull RM, Selcer EV. Poliartritis kod psa povezan s Ehrlichia canis. J Am Vet Med Assoc. 1986;189:922-3.
16. Sainz A, Roura X, Mir. G, Estrada-Pea A, Kohn B, Harrus S, et al. Smjernice za veterinare o psećoj erlihiozi i anaplazmozi u Europi. Vektori parazita. 2015;8:75.
17. Zandvliet MM, Teske E, Piek CJ. Ehrlichia i Babesia infekcije kod pasa u Nizozemskoj. Tijdschr Diergeneeskd. 2004;129:740-5.
18. Sbrana S, Marchetti V, Mancianti F, Guidi G, Bennett D. Retrospektivna studija 14 slučajeva psećeg artritisa uzrokovanog infekcijom Leishmanijom. J Small Anim Pract. 2014;55:309–13.
19. Eberts MD, Diniz PPVP, Beall MJ, Stillman BA, Chandrashekar R, Breitschwerdt EB. Tipične i atipične manifestacije infekcije Anaplasma phagocytophilum u pasa. J Am Anim Hosp Assoc. 2011;47:e86-94.
20. Hodges S, Rishniw M. Intraarticular Dirofilaria immitis microfilariae u dva psa. Vet Parasitol. 2008;152:167-70.
21. Gabrielli S, Giannelli A, Brianti E, Dantas-Torres F, Bufalini M, Fraulo M, et al. Kronični poliartritis povezan s infekcijom Cercopithifilaria bainae u psa. Vet Parasitol. 2014;205:401–4.
22. P.rez C, Maggi RG, Diniz PPVP, Breitschwerdt EB. Molekularna i serološka dijagnoza infekcije Bartonella u 61 psa iz Sjedinjenih Država. J Vet Intern Med 2011;25:805–10.
23. Rondeau MP, Walton RM, Bissett S, Drobatz KJ, Washabau RJ. Gnojna, neseptična poliartropatija u pasa. J Vet Int Med 2005;19:654–62.
24. Mylonakis ME, Soubasis N, Balakrishnan N, Theodorou K, Kasabalis D, Saridomichelakis M, et al. Molekularna identifikacija vrsta Bartonella u pasa s lišmaniozom (Leishmania infantum) sa ili bez citoloških dokaza artritisa. Vet Microbiol. 2014;174:272–5.
25. Francino O, Altet L, Sanchez-Robert E, Rodriguez A, Solano-Gallego L, Alberola J, et al. Prednosti PCR testa u stvarnom vremenu za dijagnozu i praćenje lišmanioze pasa. Vet Parasitol. 2006;137:214–21.
26. Movilla R, Altet L, Serrano L, Tabar MD, Roura X. Molekularna detekcija vektorskih patogena u uzorcima krvi i slezene pasa s bolešću slezene. Vektori parazita. 2017.;10:131.
27. Martínez V, Quilez J, Sanchez A, Roura X, Francino O, Altet L. Pseća lišmanijaza: ključne točke za interpretaciju rezultata qPCR. Vektori parazita. 2011;4:57.
28. Me. G, Montoya A, Roura X, G.lvez R, Sainz A. Stope seropozitivnosti za uzročnike vektorskih bolesti pasa u Španjolskoj: multicentrična studija. Vektori parazita. 2013.;6:117.
29. Agut A, Corzo N, Murciano J, Laredo FG, Soler M. Klinička i radiografska studija lezija kostiju i zglobova kod 26 pasa s lišmanijom. Vet Rec. 2003;153:648–52.
30. Sappendel RJ, Ferrer L. Leishmaniosis. U: Greene CE, urednik. Infect Dis Dog Cat. Philadelphia: Saunders; 1990. str. 450–7.
31. Lennox WJ, Smari ME, Littke PB. Pseća lišmanijaza u Kanadi. Can Vet J 1972;13:188–90.
32. Turrel JM, Pool R. Koštane lezije u četiri psa s visceralnom lišmanijom. Vet Radiol. 1982;23:243–9.
33. Solano D, Mir. G, Koutinas A, Cardoso L, Pennisi MG, Ferrer L, et al. Grupa LeishVet. Smjernice LeishVeta za praktično liječenje pseće lišmanioze. Vektori parazita. 2011;4:86.
34. Camino E, Buendia A, Dorrego A, Pozo P, de Juan L, Dominguez L, et al. Seromolekularno istraživanje i čimbenici rizika od piroplazmoze konja u konja u Španjolskoj. Equine Vet J. 2021;53:771–9.
35. Solano-Gallego L, Sainz A, Roura X, Estrada-Pe.a A, Mir. G. Pregled pseće babezioze: europska perspektiva. Vektori parazita. 2016;9:336.
36. Shaw SE, Day MJ, Lerga A, Birtles RJ, Kenny MJ. Anaplasma (Ehrlichia) phagocytophila: uzrok meningoencefalitisa/poliartritisa u pasa? J Vet Intern Med. 2002;16:636.
37. Tabar MD, Francino O, Altet L, Sanchez A, Ferrer L, Roura X. PCR istraživanje vektorskih patogena kod pasa koji žive u Barceloni i okolici, području endemskom za lišmaniju. Vet Rec. 2009;164:112–6.
38. Pe.a MT, Naranjo C, Klauss G, Fondevila D, Leiva M, Roura X, et al. Histopatološke značajke očne lišmanioze u pasa. J Comp Pathol. 2008;138:32–9.