지중해 지역에 서식하는 두개십자인대 파열 개에서 벡터매개 병원체 검출

2022년 Maria‑Dolores Tabar, Javier Tabar, Carolina Naranjo, Laura Altet 및 Xavier Roura의 연구에서 발췌

https://doi.org/10.1186/s13071-022-05205-x

Sven Jan Arndt가 번역 및 단축함

소개

지중해 지역에 거주하는 두개십자인대 파열이 있는 개에서 벡터 매개 병원체를 검출하는 것은 동물의 건강과 복지에 매우 중요합니다. 주의 깊은 검사와 분석을 통해 잠재적인 감염을 식별하고 질병 확산을 막기 위한 적절한 조치를 취할 수 있습니다.

개에게 병원균을 전염시키는 진드기나 벼룩과 같은 매개체의 역할을 과소평가해서는 안 됩니다. 이 작은 기생충은 라임병, 에를리히증, 레슈마니아증과 같은 다양한 위험한 질병을 전염시킬 수 있습니다. 따라서 지중해 지역에서 두개골 십자인대 파열이 있는 개에서 이러한 병원체를 식별하기 위한 구체적인 검출 방법을 개발하는 것이 중요합니다.

효과적인 진단을 위해서는 다양한 기술과 테스트의 조합이 필요합니다. 여기에는 예를 들어 혈청학적 검사, 중합효소연쇄반응(PCR)과 같은 분자 검사 또는 감염의 증상과 징후를 탐지하기 위한 임상 검사가 포함됩니다. 이러한 포괄적인 접근법을 통해 정확한 진단이 이루어지고 적절한 치료가 시작될 수 있습니다.

지중해 지역에서 두개십자인대 파열이 있는 개에서 벡터 매개 병원체를 검출하려면 수의사, 실험실 및 연구 기관 간의 긴밀한 협력이 필요합니다. 공동의 노력을 통해서만 이러한 질병에 대한 이해를 심화하고 예방 조치를 개발하며 개의 건강을 개선할 수 있습니다.

전반적으로, 지중해 지역에서 두개십자인대 파열이 있는 개에서 벡터 매개 병원체를 검출하는 것은 감염 확산을 억제하고 동물의 복지를 보장하는 중요한 단계가 될 것입니다.

배경

두개골 십자인대 파열( CCLR )은 개의 골반 사지 파행의 일반적인 원인이며, 가장 흔히 인대 파열을 초래하는 퇴행성 과정으로 인해 발생합니다. 연령, 품종, 성별, 중성화 상태 및 체중과 같은 여러 가지 위험 요소가 설명되었습니다 [1,2]. CCLR은 유전적, 해부학적 구조, 만성 관절 염증과 관련된 다인자적 기원을 가지고 있으며 결국 인대 파열 및 골관절염을 유발하는 것으로 여겨집니다

퇴행성 CCL 병변의 발생에는 면역병리학적 기전이 관여할 수 있다고 제안되었으며[5], 더욱이 림프형질구성 활막염은 CCLR이 있는 개에서 흔히 발견됩니다[6]. 따라서 십자인대 섬유 손상 및 결과적으로 CCLR의 발생에 있어 만성 윤활막염의 역할에 대해 두 가지 가설이 제안되었습니다. 첫 번째 가설은 윤활막염이 인대 섬유의 점진적인 파괴로 이어지는 거의 일차적인 사건이라는 것입니다[7].

두 번째 이유는 몇몇 고유한 이전 간행물에서 건강한 무릎 관절에 비해 CCLR이 있는 개의 염증이 있는 무릎 관절 생검에서 윤활막의 세균 부담이 증가했다고 보고했으며, 이는 환경 박테리아가 지속적인 만성 윤활막염을 유발할 수 있음을 시사합니다[8, 9]. 다음과 같은 다른 유형의 병원체 벡터 매개 병원체(VBP)와 같은 다른 병원체는 개에서 급성 및 만성 관절 질환을 일으킬 수 있지만 CCLR에서의 이들의 역할은 철저히 조사되지 않았습니다[10-14].

최근 브라질에서 진행된 한 연구에서는 리슈만편모충증이 있는 개 46마리 중 91.3%에서 신체검사, X-ray 및/또는 컴퓨터 단층촬영에서 관절 이상이 발견된 것으로 보고되었으나, CCLR은 설명된 관절 이상이 포함된 목록에 포함되지 않았습니다. ]. Ehrlichiacanis, Anaplasma phagocytophilum, Rickettsiarickettsii, Borrelia burgdorferi, Babesia canis, Bartonellavinsonii subsp.와 같은 기타 VBP. berkhoffii와 filariae는 또한 다음과 같은 관절 질환과 관련이 있습니다. B. 개의 다발성 관절염[4,10,15-24].

이 연구의 목적은 CCLR이 있는 개에서 다중 VBP를 감지하고, VBP와 CCLR의 존재 사이에 관계가 있는지 확인하고, CCLR과 VBP가 있는 개의 윤활막에 특정 염증 패턴의 존재를 확인하는 것입니다.

행동 양식

이는 CCLR의 수술적 치료를 위해 제출된 46마리의 개와 관절과 관련 없는 상태로 인해 안락사된 16마리의 대조군 개를 포함하는 전향적 연구였습니다. 수집된 샘플에는 혈액, 윤활액 및 윤활막 생검이 포함되었습니다.

병원체 테스트에는 Leishmania infantum(정량적 ELISA), Ehrlichiacanis/ewingii, Borrelia burgdorferi, Anaplasma phagocytophilum/platys 및 Dirofilaria immitis(4DX IDEXX 테스트)에 대한 혈청학은 물론 L. infantum, Ehrlichia/Anaplasma spp, Bartonella spp., piroplasms에 대한 PCR이 포함되었습니다. EDTA 전혈(EB) 및 윤활액(SF) 샘플의 (Babesia spp. 및 Theileria spp.) 및 filariae(D. immitis, Dirofilaria repens, Acanthocheilonema dracunculoides, Acanthocheilonema reconditum 및 Cercopithifilariaspp.). 또한 SF 세포학 및 윤활막의 조직병리학적 평가를 수행했습니다.

결과

연구에는 개 62마리(CCLR 개 46마리, 대조견 16마리)가 포함되었습니다. 6개월에서 11세 사이의 암컷 개 25마리(온전한 17마리, 중성화 8마리)와 수컷 개 21마리(온전한 15마리, 중성화 6마리)가 CCLR에 영향을 받았습니다. 16개의 다른 품종이 있었고, 가장 흔한 것은 혼합 품종 개(n = 18)였습니다. 대조군에는 4~17세의 암컷 8마리(온전한 4마리, 중성화 4마리)와 수컷 8마리(온전한 6마리, 중성화 2마리)와 10가지 품종이 있었습니다(추가 파일 1: 표 S1).

안락사의 사유로는 신생물(5건), 만성 신부전(2건), 위 확장 염전(1건), 뇌하수체 부신피질항진증(1건), 추간판 탈출증(2건), 요도 폐쇄(1건), 심부전(2건), 난치성 간질 등이 있었습니다. (1개) 및 급성 간부전(1개).

본 연구에 포함된 개 중 VBP 감염을 암시하는 임상 병력, 임상 징후 또는 임상병리학적 이상이 없었으며, CCLR 그룹에서 VBP 유병률은 19.6%(9/46)였습니다. Leishmania infantum은 6마리의 개에서 검출되었으며, 그 중 3마리는 혈청 양성, 1마리는 SF-PCR 양성, 2마리는 모두 혈청 양성 및 SF-PCR 양성이었습니다. 에를리히아종(Ehrlichia spp.) 3마리의 개에서 검출되었으며, 그 중 2마리는 혈청 양성이었고, 1마리는 혈청 양성 및 혈액 PCR 양성(E. canis)이었습니다.

이들 개 중 한 마리는 L. infantum(SF-PCR 양성) 및 Ehrlichia spp.에 감염되었습니다. 동시 감염(혈청양성). 마지막으로 개의 SF 샘플에서 Theileriaequi DNA가 검출되었습니다(추가 파일 2: 표 S2). 대조군의 개에서 VBP 유병률은 18.8%(3/16)였습니다. 3마리의 개 모두 L. infantum에 양성 반응을 보였으며, 한 마리는 혈청 양성 반응을 보였고, 한 마리는 혈액 PCR 양성 반응을 보였고, 다른 한 마리는 혈청 양성 반응을 보였고, 혈액과 SF PCR 모두 양성 반응을 보였습니다(추가 파일 2: 표 S2). 이 연구에 포함된 모든 개들의 SF 도말 검사에서 광학 현미경으로 VBP가 검출되지 않았으며 VBP의 전반적인 유병률은 CCLR이 있는 개와 대조군 개 사이에 통계적으로 다르지 않았습니다[교차비(OR) = 0.949, 95% 신뢰도 간격(CI) 0.22-4.05, P = 0.629].

단측 CCLR은 29마리의 개(그 중 5마리는 VBP)에서 발견되었으며, CCLR은 17마리의 개(그 중 4마리는 VBP)에서 양측에서 발생했습니다. 이는 양측 CCLR의 존재가 VBP가 있는 개에서 통계적으로 더 흔하지 않음을 의미합니다(OR = 0.677). , 95% CI 0.15-2.97, P = 0.439). 윤활막 생검에 대한 조직병리학적 검사에서는 CCLR이 있는 개 중 45.6%(21/46)에서 림프형질구성(17), 호중구(1), 육아종(1), 혼합 림프형질구성 및 육아종(2)을 포함한 다양한 염증 패턴을 갖는 윤활막염이 나타났습니다. 대조군 개 중 43.7%(7/16)에서 모두 림프형질세포 침윤이 있었습니다.

윤활막염의 존재는 대조군 개(χ2 = 0.017, df = 1, P = 0.895) 또는 VBP가 있거나 없는 개(χ2 = 0.141, df = 1, P = 0.708)에 비해 CCLR이 있는 개에서 통계적으로 더 흔하지 않았습니다. . 또한 CCLR이 있거나 대조견인지 여부에 관계없이 VBP가 있는 개에서는 다르거나 특정한 염증 패턴이 발견되지 않았습니다.(추가 파일 2: 표 S2) CCLR이 있는 VBP 양성 개 결과를 검토할 때 개 3마리 중 2마리는 L. infantum PCR 양성이지만 레슈마니아 감염에 대한 사전 임상 병력이나 진단이 없는 경우 CCLR 수술 후 9~12개월 사이에 명백한 레슈마니아증을 암시하는 임상 징후가 나타났습니다(추가 파일 2:표 S2).

논의

이 연구는 CCLR에서 VBP의 역할이나 VBP 양성 개에서 관절 염증의 특정 패턴의 존재를 입증하지 못했습니다. 그러나 여러 벡터 매개 질병이 개의 관절 손상과 관련되어 있었지만 [4, 10, 14, 16 - 22, 24] 그 중 일부, 특히 레슈마니아증은 본 연구가 수행된 지역의 풍토병으로 간주됩니다 [28].

CCLR 발병의 원인 또는 보조 인자로서 다양한 매개체 매개 유기체의 역할을 명확히 하기 위해서는 더 큰 규모의 사례 관리 연구가 필요할 것입니다. 개 레슈마니아증의 경우, 관절 이상을 선별하기 위해 정형외과 검사와 영상(방사선학 및/또는 컴퓨터 단층촬영)을 결합했을 때 정형외과적 문제 발생률이 44.8%에서 91.3%로 보고되었습니다[14, 29]. 정형외과 검사에서 확인된 이상에는 관절 강직, 파행, 연조직 부종, 관절 통증 또는 염발음, 기능 장애 등이 포함됩니다.

CCLR이 있는 개는 이러한 정형외과적 이상 중 하나 이상을 가질 수 있지만 이전 연구에서는 리슈마니아증을 앓고 있는 개에서 CCLR의 유병률에 대한 구체적인 정보가 없었습니다. 이론적으로 리슈마니아증의 파행은 뼈나 근육이 추가적으로 침범된 다발성 관절염으로 인해 발생할 수 있으며, 일반적으로 III형 과민 반응으로 인한 관절의 면역 복합체 침착과 관련된 염증에 이차적입니다[4, 12, 30].

그러나 원발성 관절 감염도 발생할 수 있으며 윤활액의 세포학적 검사와 윤활막의 조직학적 검사를 통해 대식세포에서 기생충이 확인되었습니다[31, 32]. 따라서 감염된 개는 단일관절염, 소수관절염 또는 다발관절염을 나타낼 수 있으며[18], 일부 보고에 따르면 거의 80%의 경우에 무릎 관절이 영향을 받을 수 있습니다[14]. 이 연구에서 L. infantum은 CCLR이 있는 개에서 발견된 가장 흔한 VBP였지만, 그 유병률은 대조견의 유병률과 크게 다르지 않았으며, 이는 Leishmania 감염이 CCLR의 발병에 역할을 하지 않는다는 것을 시사합니다.

두 그룹의 개 모두에서 검출에 대한 가능한 설명은 레슈마니아증 발병 지역에서 무증상 감염의 높은 유병률일 수 있습니다[28, 33].

다발성 관절염과 에를리히증 사이의 연관성은 이전에 보고되었습니다. 그러나 이에 대한 명확한 증거가 없고, 다른 동시감염 가능성도 배제되지 않아 연관성이 논란이 되고 있다[10, 15-17]. 본 연구에서는 CCLR이 있는 개 3마리에서 Ehrlichia 항체 또는 DNA가 검출되었습니다. 그러나 혈청 양성 개 2마리에서만 감염을 확인할 수 없었는데, 이는 단순히 노출이나 이전 감염에 의한 것일 수 있습니다. 혈청반응 양성이고 E. canis PCR 양성인 세 번째 개는 CCLR 수술 전후에 명백한 또는 무증상 에를리히증을 암시하는 다른 임상 증상이나 검사실 이상이 없었습니다.

이는 개가 질병의 급성 단계에 있었고 스스로 회복되었거나 무증상 단계에 있음을 나타낼 수 있습니다. 두 시나리오 모두 CCLR과 Ehrlichia 감염 사이의 연관성을 배제할 가능성이 높습니다. Theileria qui는 스페인에서 유행하는 말 피로플라스마 중 하나이며, 거의 절반의 말에 항체가 있거나 순환하는 기생충증이 있습니다[34].

이 기생충은 때때로 개에서 발견되었으나 역학적, 임상적 중요성은 아직 알려지지 않았습니다[35]. 이 모든 것과 SF에서 T. 에퀴를 사용한 이 연구에서 개가 연구 기간 동안 다른 임상병리학적 이상을 나타내지 않았다는 사실은 이 병원체가 기회주의적이며 CCLR에 대해 임상적 중요성이 없음을 나타낼 수 있습니다.

Bartonella, A. phagocytophilum, B. burgdorferi, Filariae 또는 Babesia와 같은 기타 피로플라스마가 급성 또는 만성 개 다발성 관절염과 관련되어 있지만[10, 13, 17, 19-22, 36], 이 연구에서 개는 어떤 개에서도 양성 반응을 보이지 않았습니다. 이들 병원체 중. 이러한 결과는 본 연구에서 조사한 지역의 이전 연구에서 발견된 이러한 VBP의 지역적 지리적 유병률과 일치할 수 있습니다[16, 27, 34, 37].

그러나 사용된 기술의 제한된 민감도와 연구를 위해 채취한 샘플과 관련된 제한도 이러한 유기체를 검출할 수 없는 원인이 되었을 수 있다는 점에 유의해야 합니다. 림프형질구성 관절염은 이 연구에서 가장 흔한 조직병리학적 발견이었습니다. CCLR이 있거나 없는 개에서. 이는 림프형질구성 윤활막염이 CCLR이 있는 개에서 일반적으로 기술된 이전 간행물과 일치하지만[6] CCLR이 없는 개의 사후 샘플에서도 발견되었습니다[7].

반면, 반응성 면역매개성 관절염은 VBP 감염으로 인해 발달된 면역 복합체가 침착되어 주로 호중구성이다[4, 11, 12, 18, 29]. 이 사실은 본 연구에서 CCLR 유무에 관계없이 개 사이 또는 VBP 유무에 관계없이 염증 패턴이나 윤활막염의 빈도가 통계적으로 다르지 않다는 사실과 함께 VBP가 CCLR의 발병에 아무런 역할을 하지 않는다는 생각을 강화합니다.

통계적으로 유의하지는 않지만, 본 연구에서 CCLR을 앓고 있는 개 3마리는 레슈마니아증 환자의 여러 조직에서도 관찰되는 염증의 일종인 육아종성 윤활막염을 보였지만[33, 38], 이들 중 단 한 마리만이 레슈마니아증에 양성 반응을 보였습니다. 육아종성 염증은 일반적으로 조직 내 Leishmania의 존재와 연관되어 있지만[12, 13], 육아종성 윤활막염이 있는 이 혈청 양성 및 LeishmaniaPCR 양성 개에서는 편모성이 발견되지 않았습니다.

다른 두 마리의 개에서 육아종성 염증의 원인은 아직 불분명합니다. 따라서, 현재 연구에서는 이들 개 중 일부에서 윤활막염 및 아마도 CCLR의 발병기전에서 이들 VBP의 가능한 역할을 확실히 배제할 수는 없습니다. 이 연구에는 몇 가지 한계가 있습니다. 엄격한 선정 기준으로 인해 모집에 어려움이 있는 개 수가 적다는 점과 대조군을 대상으로 한 전향적 연구라는 점에서 통계 결과를 주의 깊게 다뤄야 한다는 뜻이다.

또한, CCLR에 대한 수술적 치료를 받은 개만 포함되어 초기에 VBP 및 CCLR로 진단되어 최종적으로 수술을 받지 않은 개는 제외되었습니다. 또 다른 제한점은 대조견의 안락사를 초래하는 다양한 질병과 특히 대조 개체군의 평균 연령이 더 높기 때문에 관절 표면이 평가되지 않았다는 사실이었습니다.

그러나 과거 ÖVPP 감염이나 관절에 영향을 미칠 수 있는 질병을 배제하기 위해 병력을 종합적으로 평가했습니다. 또한 대조군 개는 CCLR 개와 동일한 기간, 동일한 장소에서 검사를 받았기 때문에 VBP 검출 가능성에는 큰 영향을 미치지 않았습니다. 마지막 한계는 VBP의 존재 여부를 결정하는 것과 관련이 있습니다. 본 연구에서는 VBP 검출 확률을 최대화하기 위해 혈청학, SF 세포학 및 윤활막 생검의 현미경 검사, 혈액 및 SF의 PCR을 사용했습니다.

그러나 양성 혈청학은 관절에서 발견된 이상의 인과성을 입증하지 못했습니다. 더욱이, 찾고 있는 모든 병원체에 대해 혈청학을 수행하는 것이 불가능했고, 선택된 VBP를 검출할 확률을 높이기 위해 생검에 대해 면역조직화학 및/또는 PCR을 수행할 수도 없었습니다.

결론

이 연구는 개에서 CCLR의 발병기전에서 다양한 VBP의 역할이나 병원체 양성 개에서 관절 염증의 존재 또는 다른 패턴을 입증하지 못했습니다. 그러나 본 연구의 한계를 극복하기 위해서는 개에서 VBP와 CCLR 사이의 가능한 연관성을 명확히 하기 위한 추가 연구가 필요할 수 있습니다.

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