Otkrivanje vektorskih patogena u pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta koji žive u mediteranskoj regiji
Izvadci iz studije Marije‑Dolores Tabar, Javiera Tabara, Caroline Naranjo, Laure Altet i Xaviera Roure iz 2022.
https://doi.org/10.1186/s13071-022-05205-x
preveo i skratio Sven Jan Arndt
Uvod
Otkrivanje vektorskih patogena kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta koji žive u mediteranskoj regiji od velike je važnosti za zdravlje i dobrobit životinja. Pažljivim ispitivanjem i analizom mogu se identificirati potencijalne infekcije i mogu se poduzeti odgovarajuće mjere za suzbijanje širenja bolesti.
Ne treba podcjenjivati ulogu vektora, poput krpelja ili buha, u prijenosu patogena na pse. Ovi sićušni paraziti mogu prenijeti razne opasne bolesti poput lajmske bolesti, erlihioze ili lišmanioze. Stoga je važno razviti specifične metode detekcije za identifikaciju ovih patogena u pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta u mediteranskoj regiji.
Učinkovita dijagnoza zahtijeva kombinaciju različitih tehnika i testova. To uključuje, primjerice, serološke testove, molekularne pretrage kao što je lančana reakcija polimerazom (PCR) ili kliničke pretrage za otkrivanje simptoma i znakova infekcije. Ovaj sveobuhvatan pristup omogućuje postavljanje točne dijagnoze i započinjanje odgovarajućeg liječenja.
Otkrivanje vektorskih patogena kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta u mediteranskoj regiji zahtijeva blisku suradnju između veterinara, laboratorija i istraživačkih institucija. Samo zajedničkim naporima možemo produbiti razumijevanje ovih bolesti, razviti preventivne mjere i poboljšati zdravlje pasa.
Općenito, otkrivanje vektorskih patogena kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta u mediteranskoj regiji bio bi važan korak u suzbijanju širenja infekcija i osiguravanju dobrobiti životinja.
pozadina
Ruptura kranijalnog križnog ligamenta ( CCLR ) čest je uzrok hromosti zdjeličnih udova u pasa, najčešće zbog degenerativnog procesa koji rezultira rupturom ligamenta. Opisano je nekoliko čimbenika rizika, kao što su dob, pasmina, spol, status sterilizacije i težina [1,2]. vjeruje se da CCLR ima multifaktorijalno podrijetlo koje uključuje genetiku, anatomiju i kroničnu upalu zglobova, što na kraju dovodi do rupture ligamenta i osteoartritisa [3, 4].
Pretpostavlja se da bi imunopatološki mehanizmi mogli biti uključeni u razvoj degenerativnih CCL lezija [5], a nadalje, limfoplazmocitni sinovitis čest je nalaz u pasa s CCLR [6]. Stoga su predložene dvije hipoteze o ulozi kroničnog sinovitisa u razvoju oštećenja vlakana križnog ligamenta i, posljedično, CCLR-a. Prva hipoteza je da je sinovitis gotovo primarni događaj koji dovodi do progresivnog uništenja ligamentnih vlakana [7].
Drugi razlog je taj što je nekoliko inherentnih prethodnih publikacija izvijestilo o povećanom bakterijskom opterećenju sinovijalne membrane u biopsijama upaljenih zglobova koljena pasa s CCLR-om u usporedbi sa zdravim zglobovima koljena, što sugerira da bakterije iz okoliša mogu izazvati perzistentni kronični sinovitis [8, 9]. Druge vrste patogena, kao npr Drugi patogeni, poput vektorskih patogena (VBP), mogu uzrokovati akutne i kronične bolesti zglobova u pasa, ali njihova uloga u CCLR-u nije temeljito istražena [10-14].
U nedavnoj studiji u Brazilu objavljeno je da je 91,3% od 46 pasa s lišmaniozom imalo abnormalnosti zglobova otkrivene fizičkim pregledom, rendgenom i/ili kompjutoriziranom tomografijom, ali CCLR nije bio na popisu opisanih abnormalnosti zglobova [14]. ]. Druge VBP kao što su Ehrlichiacanis, Anaplasma phagocytophilum, Rickettsiarickettsii, Borrelia burgdorferi, Babesia canis, Bartonellavinsonii subsp. berkhoffii i filarije također su povezane s bolestima zglobova kao što su: B. Poliartritis, u pasa [4,10, 15-24].
Cilj ovog istraživanja je otkriti višestruke VBP u pasa s CCLR, utvrditi postoji li povezanost između prisutnosti VBP i CCLR te utvrditi prisutnost specifičnog upalnog obrasca u sinovijalnoj ovojnici pasa s CCLR i VBP.
Metode
Ovo je bila prospektivna studija koja je uključivala 46 pasa podvrgnutih kirurškom liječenju CCLR-a i 16 kontrolnih pasa eutanaziranih zbog stanja koja nisu povezana sa zglobovima. Prikupljeni uzorci uključivali su krv, sinovijalnu tekućinu i biopsiju sinovijalne membrane.
Testiranje patogena uključivalo je serologiju za Leishmania infantum (kvantitativni ELISA), Ehrlichiacanis/ewingii, Borrelia burgdorferi, Anaplasma phagocytophilum/platys i Dirofilaria immitis (4DX IDEXX test) kao i PCR za L. infantum, Ehrlichia/Anaplasma spp., Bartonella spp., piroplazme (Babesia spp. i Theileria spp.) i filarija (D. immitis, Dirofilaria repens, Acanthocheilonema dracunculoides, Acanthocheilonema reconditum i Cercopithifilariaspp.) u EDTA uzorcima pune krvi (EB) i sinovijalne tekućine (SF). Osim toga, učinjena je SF citologija i histopatološka procjena sinovijalne membrane.
Rezultati
Studija je uključila 62 psa, 46 s CCLR i 16 kontrolnih pasa. Dvadeset pet ženki (17 intaktnih i osam kastriranih) i 21 muški pas (15 intaktnih i šest kastriranih) u dobi od 6 mjeseci do 11 godina bili su pogođeni CCLR-om. Bilo je 16 različitih pasmina, a najčešći su bili psi mješanci (n = 18). U kontrolnoj skupini bilo je osam ženki (četiri netaknute i četiri sterilizirane) i osam muških pasa (šest netaknutih i dva sterilizirana) u dobi od 4 do 17 godina i 10 različitih pasmina (Dodatna datoteka 1: Tablica S1).
Razlozi za eutanaziju uključivali su neoplaziju (pet), kronično zatajenje bubrega (dva), želučanu dilataciju-volvulus (jedan), hiperadrenokorticizam hipofize (jedan), diskus herniju (dva), opstrukciju uretre (jedan), zatajenje srca (dva), refraktornu epilepsiju (jedan) i akutno zatajenje jetre (jedan).
Nijedan od pasa uključenih u ovu studiju nije imao kliničku povijest, kliničke znakove ili kliničko-patološke abnormalnosti koje bi upućivale na infekciju VBP-om. Prevalencija VBP-a u skupini CCLR bila je 19,6% (9/46). Leishmania infantum otkrivena je kod šest pasa, od kojih su tri bila seropozitivna, jedan je bio SF-PCR pozitivan, a dva su bila i seropozitivna i SF-PCR pozitivna. Ehrlichia spp. otkriveni su u tri psa, od kojih su dva bila seropozitivna, a jedan je bio seropozitivan i pozitivan na PCR krvi (E. canis).
Jedan od tih pasa bio je zaražen L. infantum (SF-PCR pozitivan) i Ehrlichia spp. koinficirani (seropozitivni). Konačno, DNK Theileriaequi otkrivena je u SF uzorku psa (Dodatna datoteka 2: Tablica S2). U kontrolnoj skupini prevalencija VBP-a u pasa bila je 18,8% (3/16). Sva tri psa bila su pozitivna na L. infantum, jedan seropozitivan, jedan pozitivan na PCR u krvi i jedan seropozitivan i oba psa u krvi i SF PCR pozitivni (Dodatna datoteka 2: Tablica S2). Svjetlosnom mikroskopijom u SF razmazu bilo kojeg od pasa uključenih u ovu studiju nisu otkriveni VBP-ovi, a ukupna prevalencija VBP-a nije bila statistički različita između pasa s CCLR-om i kontrolnih pasa [omjer izgleda (OR) = 0,949, 95% pouzdanost interval (CI) 0,22-4,05, P = 0,629].
Unilateralni CCLR nađen je u 29 pasa (od kojih pet s VBP-om), dok se CCLR obostrano pojavio u 17 pasa (četiri s VBP-om), što znači da prisutnost obostranog CCLR-a nije bila statistički češća u pasa s VBP-om (OR = 0,677). , 95% CI 0,15-2,97, P = 0,439). Histopatološki pregled biopsija sinovijalne membrane otkrio je sinovitis s različitim upalnim uzorcima uključujući limfoplazmocitni (17), neutrofilni (jedan), granulomatozni (jedan) i miješani limfoplazmocitni i granulomatozni (dva) u 45,6% (21/46) pasa s CCLR); i kod 43,7% (7/16) kontrolnih pasa, od kojih su svi imali limfoplazmocitnu infiltraciju.
Prisutnost sinovitisa nije bila statistički češća u pasa s CCLR u usporedbi s kontrolnim psima (χ2 = 0,017, df = 1, P = 0,895) ili u pasa s ili bez VBP (χ2 = 0,141, df = 1, P = 0,708) . Nadalje, kod pasa s VBP-om nije pronađen drugačiji ili specifičan upalni obrazac, bez obzira na to jesu li imali CCLR ili su bili kontrolni psi (Dodatna datoteka 2: Tablica S2). Pri pregledu rezultata VBP-pozitivnih pasa s CCLR-om, dva od tri psa s L. infantum pozitivnim na PCR, ali bez prethodne kliničke povijesti ili dijagnoze infekcije lišmanijom, razvio je kliničke znakove koji upućuju na očitu lišmaniozu između 9 i 12 mjeseci nakon CCLR operacije (dodatna datoteka 2: tablica S2).
rasprava
Ova studija nije uspjela dokazati ulogu VBP-a u CCLR-u niti prisutnost specifičnog uzorka upale zglobova u VBP-pozitivnih pasa, iako je nekoliko vektorskih bolesti povezano s oštećenjem zglobova u pasa [4, 10, 14, 16 - 22, 24], a neke od njih, posebice lišmanijaza, smatraju se endemima na području gdje je provedeno ovo istraživanje [28].
Vjerojatno će biti potrebne veće slučaj-kontrolne studije kako bi se razjasnila uloga različitih organizama koji se prenose vektorima kao uzročnika ili kofaktora u razvoju CCLR-a. Kod lišmanioze pasa, prijavljena je incidencija ortopedskih problema u rasponu od 44,8% do 91,3% kada su i ortopedski pregled i snimanje (radiologija i/ili kompjutorizirana tomografija) bili kombinirani kako bi se otkrile abnormalnosti zglobova [14, 29]. Abnormalnosti uočene na ortopedskom pregledu uključuju ukočenost zglobova, hromost, oticanje mekog tkiva, bol u zglobu ili krepitaciju i funkcionalnu nesposobnost.
Psi s CCLR-om mogu imati jednu ili više od ovih opisanih ortopedskih anomalija, ali u prijašnjim studijama nije bilo specifičnih podataka o prevalenciji CCLR-a kod pasa koji boluju od lišmanioze. Teoretski, hromost kod lišmanioze može biti uzrokovana poliartritisom s dodatnom zahvaćenošću kostiju ili mišića, obično sekundarnom upalom povezanom s taloženjem imunoloških kompleksa u zglobu zbog reakcije preosjetljivosti tipa III [4, 12, 30].
Međutim, također može doći do primarne infekcije zglobova, a paraziti su identificirani u makrofagima citološkim pregledom sinovijalne tekućine i histološkim pregledom sinovijalnih membrana [31, 32]. Tako zaraženi psi mogu imati monoartritis, oligoartritis ili poliartritis [18], a prema nekim izvješćima koljeni zglob može biti zahvaćen u gotovo 80% slučajeva [14]. U ovoj studiji, L. infantum je bio najčešći VBP otkriven u pasa s CCLR-om, iako se njegova prevalencija nije značajno razlikovala od prevalencije kontrolnih pasa, što sugerira da infekcija Leishmanijom ne igra ulogu u patogenezi CCLR-a.
Moguće objašnjenje otkrivanja u obje skupine pasa mogla bi biti visoka prevalencija subkliničke infekcije u endemičnom području lišmanioze [28, 33].
Prethodno je prijavljena povezanost između poliartritisa i erlihioze; međutim, nije bilo jasnih dokaza za to, a druge moguće koinfekcije nisu bile isključene, pa je povezanost bila kontroverzna [10, 15-17]. U ovoj studiji, antitijela ili DNK Ehrlichia otkriveni su u tri psa s CCLR. Međutim, infekcija nije mogla biti potvrđena kod jedina dva seropozitivna psa, što može biti jednostavno posljedica izloženosti ili prethodne infekcije. Treći pas, koji je bio seropozitivan i E. canis PCR pozitivan, nije imao druge kliničke simptome ili laboratorijske abnormalnosti koje bi upućivale na očitu ili subkliničku erlihiozu prije ili nakon CCLR operacije.
To bi moglo značiti da je pas bio u akutnom stadiju bolesti i da se sam oporavio ili da je bio u subkliničkom stadiju. Oba scenarija vjerojatno isključuju vezu između CCLR-a i infekcije bakterijom Ehrlichia. Theileria equi jedna je od piroplazmi konja koja je enzootska u Španjolskoj, a gotovo polovica konja ima antitijela ili cirkulirajuću parazitemiju [34].
Ovaj je parazit povremeno otkriven u pasa, ali njegov epidemiološki i klinički značaj ostaje nepoznat [35]. Sve ovo i činjenica da pas u ovoj studiji s T. equi u SF nije imao drugih kliničko-patoloških abnormalnosti tijekom cijelog razdoblja studije može ukazivati na to da je ovaj patogen bio oportunistički i da nije imao klinički značaj za CCLR.
Iako su Bartonella, A. phagocytophilum, B. burgdorferi, Filariae ili druge piroplazme kao što je Babesia povezane s akutnim ili kroničnim poliartritisom pasa [10, 13, 17, 19-22, 36], niti jedan pas u ovoj studiji nije bio pozitivan na bilo koji ovih patogena. Ovi rezultati mogu biti u skladu s lokalnom geografskom prevalencijom ovih VBP-ova pronađenih u prethodnim studijama na području koje je ispitivano u ovoj studiji [16, 27, 34, 37].
Međutim, treba napomenuti da su ograničena osjetljivost korištenih tehnika i ograničenja povezana s uzorcima uzetim za studiju također mogli pridonijeti nemogućnosti otkrivanja ovih organizama.Limfoplazmocitni artritis bio je najčešći histopatološki nalaz u ovoj studiji, oba u pasa sa i bez CCLR. To je u skladu s prethodnim publikacijama u kojima se limfoplazmocitni sinovitis obično opisivao kod pasa s CCLR [6], ali je također otkriven u postmortalnim uzorcima pasa bez CCLR [7].
S druge strane, reaktivni imunološki posredovani artritis pretežno je neutrofilan zbog taloženja razvijenih imunoloških kompleksa kao rezultat infekcije VBP [4, 11, 12, 18, 29]. Ova činjenica pojačava ideju da VBP ne igra nikakvu ulogu u patogenezi CCLR-a, zajedno s činjenicom da ni upalni obrazac ni učestalost sinovitisa nisu bili statistički različiti između pasa s ili bez CCLR-a ili između pasa s ili bez VBP-a u ovoj studiji.
Iako nije statistički značajno, tri psa s CCLR-om u ovoj studiji pokazala su granulomatozni sinovitis, vrstu upale koja je također opažena u nekoliko tkiva pacijenata oboljelih od lišmanioze [33, 38], ali samo je jedan od njih bio pozitivan na lišmaniozu. Iako je granulomatozna upala obično povezana s prisutnošću Leishmanije u tkivu [12, 13], u ovog seropozitivnog i LeishmaniaPCR-pozitivnog psa s granulomatoznim sinovitisom nisu otkriveni amastigoti.
Uzrok granulomatozne upale kod druga dva psa ostaje nejasan. Stoga se u trenutnoj studiji ne može definitivno isključiti moguća uloga ovih VBP-a u patogenezi sinovitisa, a možda i CCLR-a kod nekih od ovih pasa. Ova studija ima neka ograničenja. Mali broj uključenih pasa, zbog poteškoća u regrutiranju slučajeva zbog strogih kriterija uključivanja i činjenice da je ovo bila prospektivna studija s kontrolnom skupinom, znači da statističke rezultate treba tretirati s oprezom.
Dodatno, uključeni su samo psi koji su primili kirurški tretman za CCLR, tako da su psi kojima je inicijalno dijagnosticiran VBP i CCLR i koji na kraju nisu podvrgnuti operaciji bili isključeni. Još jedno ograničenje bila je raznolikost bolesti koje su dovele do eutanazije kontrolnih pasa i činjenica da zglobne površine nisu bile procijenjene, osobito zato što je kontrolna populacija imala višu prosječnu dob.
Međutim, povijest bolesti je sveobuhvatno procijenjena kako bi se isključile prethodne infekcije ÖVPP-om ili bolesti koje bi mogle utjecati na zglobove. Dodatno, kontrolni psi pregledani su u istom vremenskom razdoblju i na istom području kao i CCLR psi, tako da vjerojatnost otkrivanja VBP-a nije bila toliko pogođena. Posljednje ograničenje odnosilo se na određivanje prisutnosti VBP-a. U ovoj smo studiji koristili serologiju, mikroskopiju u SF citologiji i biopsiju sinovijalne membrane, kao i PCR u krvi i SF kako bismo povećali vjerojatnost otkrivanja VBP.
Međutim, pozitivne serologije nisu bile dokaz uzročnosti abnormalnosti pronađenih u zglobu. Nadalje, nije bilo moguće provesti serologiju za sve tražene patogene, niti se imunohistokemija i/ili PCR mogli provesti na biopsiji kako bi se povećala vjerojatnost otkrivanja odabranih VBP-ova.
Zaključci
Ova studija nije uspjela dokazati ulogu različitih VBP-ova u patogenezi CCLR-a kod pasa niti prisutnost ili drugačiji obrazac upale zglobova kod pasa pozitivnih na patogene. Međutim, kako bi se prevladala ograničenja ove studije, možda će biti potrebne daljnje studije kako bi se razjasnila moguća povezanost između VBP-a i CCLR-a kod pasa.
Izvori
1. Brioschi V, Arthurs GI. Puknuće kranijalnog križnog ligamenta u malih pasa (<15 kg): narativni pregled literature. J Small Anim Pract. 2021;62:1037-50.
2. Gilbert S, Langenbach A, Marcellin-Little DJ, Pease AP, Ru H. Osteoartritis koljenog zgloba u vrijeme dijagnoze ozljede kranijalnog križnog ligamenta je veći kod boksera i pasa težih od 35 kilograma. Vet Radiol Ultrazvuk. 2019;60:280–8.
3. Comerford EJ, Smith K, Hayashi K. Najnovije informacije o etiopatogenezi bolesti lubanjskog križnog ligamenta pasa. Vet Comp Orthop Traumatol. 2011;24:91–8.
4. Bennett D. Imunološki posredovani i infektivni artritis. U: Ettinger SJ, Feldman EC, urednici. Textb Vet Intern Med Dis Dog Cat. 7. izd. Missouri: Saunders; 2010. str. 743–9.
5. Doom M, de Bruin T, de Rooster H, van Bree H, Cox E. Imunopatološki mehanizmi kod pasa s rupturom kranijalnog križnog ligamenta. Vet Immunol Immunopathol. 2008;125:143-61.
6. Erne JB, Goring RL, Kennedy FA, Schoenborn WC. Prevalencija limfoplazmocitnog sinovitisa u pasa s prirodnom rupturom kranijalnog križnog ligamenta. J Am Vet Med Assoc. 2009;235:386-90.
7. D.ring AK, Junginger J, Hewicker-Trautwein M. Degeneracija križnog ligamenta i sinovitis koljenog zgloba u 56 pasa s intaktnim kranijalnim križnim ligamentima: korelacija histoloških nalaza te broja i fenotipova upalnih stanica s dobi, tjelesnom težinom i pasminom. Vet Immunol Immunopathol. 2018;196:5–13.
8. Muir P, Oldenhoff WE, Hudson AP, Manley PA, Schaefer SL, Markel MD, et al. Otkrivanje DNA iz niza bakterijskih vrsta u zglobovima koljena pasa s upalnim artritisom koljena i povezanom degenerativnom rupturom prednjeg križnog ligamenta. Mikrobni patogen. 2007;42:47–55.
9. Schwartz Z, Zitzer NC, Racette MA, Manley PA, Schaefer SL, Markel MD, et al. Jesu li opterećenje bakterijama i sinovitis povezani kod pasa s upalnim artritisom koljenice? Vet Microbiol. 2011;148:308-16.
10. Foley J, Drazenovich N, Leutenegger CM, Chomel BB. Povezanost poliartritisa i trombocitopenije i povećane prevalencije vektorskih patogena u kalifornijskih pasa. Vet Rec. 2007;160:159–62.
11. Stull JW, Evason M, Carr AP, Waldner C. Imunološki posredovani poliartritis kod pasa: klinički i laboratorijski nalazi u 83 slučaja u zapadnoj Kanadi (1991.-2001.). Can Vet J. 2008;49:1195–203.
12. Dan MJ. Imunopatologija vektorskih bolesti pasa. Vektori parazita. 2011;4:48.
13. Koutinas AF, Koutinas CK. Patološki mehanizmi koji leže u pozadini kliničkih nalaza kod lišmanioze pasa uzrokovane Leishmania infantum/chagasi. Veterinar Pathol. 2014;51:527–38.
14. Silva ARS, Oliveira HS, Gomes AAD, Beserra HEO, Silva JP, Santos-Doni TR, et al. Zahvaćenost zglobova kod pseće visceralne lišmanioze: ortopedski fizikalni pregled, radiografski i kompjutorizirani tomografski nalazi. Vet Parasitol. 2021;299:109569.
15. Bellah JR, Shull RM, Selcer EV. Poliartritis kod psa povezan s Ehrlichia canis. J Am Vet Med Assoc. 1986;189:922-3.
16. Sainz A, Roura X, Mir. G, Estrada-Pea A, Kohn B, Harrus S, et al. Smjernice za veterinare o erlihiozi i anaplazmozi pasa u Europi. Vektori parazita. 2015; 8:75.
17. Zandvliet MM, Teske E, Piek CJ. Ehrlichia i Babesia infekcije kod pasa u Nizozemskoj. Tijdschr Diergeneeskd. 2004;129:740-5.
18. Sbrana S, Marchetti V, Mancianti F, Guidi G, Bennett D. Retrospektivna studija 14 slučajeva psećeg artritisa izazvanog infekcijom Leishmanijom. J Small Anim Pract. 2014;55:309-13.
19. Eberts MD, Diniz PPVP, Beall MJ, Stillman BA, Chandrashekar R, Breitschwerdt EB. Tipične i atipične manifestacije infekcije Anaplasma phagocytophilum u pasa. J Am Anim Hosp izv. 2011;47:e86-94.
20. Hodges S, Rishniw M. Intraarticular Dirofilaria immitis microfilariae u dva psa. Vet Parasitol. 2008;152:167-70.
21. Gabrielli S, Giannelli A, Brianti E, Dantas-Torres F, Bufalini M, Fraulo M, et al. Kronični poliartritis povezan s infekcijom Cercopithifilaria bainae u psa. Vet Parasitol. 2014;205:401–4.
22. P.rez C, Maggi RG, Diniz PPVP, Breitschwerdt EB. Molekularna i serološka dijagnoza Bartonella infekcije u 61 psa iz Sjedinjenih Država. J Vet Intern Med 2011;25:805–10.
23. Rondeau MP, Walton RM, Bissett S, Drobatz KJ, Washabau RJ. Supurativna, neseptična poliartropatija u pasa. J Vet Int Med 2005;19:654–62.
24. Mylonakis ME, Soubasis N, Balakrishnan N, Theodorou K, Kasabalis D, Saridomichelakis M, et al. Molekularna identifikacija vrste Bartonella u pasa s lišmaniozom (Leishmania infantum) sa ili bez citoloških dokaza artritisa. Vet Microbiol. 2014;174:272–5.
25. Francino O, Altet L, Sanchez-Robert E, Rodriguez A, Solano-Gallego L, Alberola J, et al. Prednosti PCR testa u stvarnom vremenu za dijagnozu i praćenje lišmanioze pasa. Vet Parasitol. 2006;137:214–21.
26. Movilla R, Altet L, Serrano L, Tabar MD, Roura X. Molekularno otkrivanje vektorskih patogena u uzorcima krvi i slezene pasa s bolešću slezene. Vektori parazita. 2017;10:131.
27. Martínez V, Quilez J, Sanchez A, Roura X, Francino O, Altet L. Pseća lišmanijaza: ključne točke za interpretaciju rezultata qPCR. Vektori parazita. 2011;4:57.
28. Ja. G, Montoya A, Roura X, G.lvez R, Sainz A. Stope seropozitivnosti za uzročnike vektorskih bolesti pasa u Španjolskoj: multicentrična studija. Vektori parazita. 2013;6:117.
29. Agut A, Corzo N, Murciano J, Laredo FG, Soler M. Klinička i radiografska studija lezija kostiju i zglobova u 26 pasa s lišmaniozom. Vet Rec. 2003;153:648–52.
30. Sappendel RJ, Ferrer L. Leishmaniosisa. U: Greene CE, urednik. Infect Dis Dog Cat. Philadelphia: Saunders; 1990. str. 450–7.
31. Lennox WJ, Smari ME, Littke PB. Lišmanijaza pasa u Kanadi. Can Vet J 1972;13:188–90.
32. Turrel JM, Pool R. Koštane lezije u četiri psa s visceralnom lišmaniozom. Vet Radiol. 1982;23:243-9.
33. Solano D, Mir. G, Koutinas A, Cardoso L, Pennisi MG, Ferrer L, et al. Grupa LeishVet. LeishVet smjernice za praktično liječenje lišmanioze kod pasa. Vektori parazita. 2011;4:86.
34. Camino E, Buendia A, Dorrego A, Pozo P, de Juan L, Dominguez L, et al. Seromolekularno istraživanje i čimbenici rizika od piroplazmoze konja u konja u Španjolskoj. Equine Vet J. 2021;53:771–9.
35. Solano-Gallego L, Sainz A, Roura X, Estrada-Pe.a A, Mir. G. Pregled babezioze pasa: Europska perspektiva. Vektori parazita. 2016;9:336.
36. Shaw SE, Day MJ, Lerga A, Birtles RJ, Kenny MJ. Anaplasma (Ehrlichia) phagocytophila: uzročnik meningoencefalitisa/poliartritisa kod pasa? J Vet Intern Med. 2002;16:636.
37. Tabar MD, Francino O, Altet L, Sanchez A, Ferrer L, Roura X. PCR istraživanje vektorskih patogena kod pasa koji žive u i oko Barcelone, područja endemskog za lišmaniozu. Vet Rec. 2009;164:112–6.
38. Pe.a MT, Naranjo C, Klauss G, Fondevila D, Leiva M, Roura X, et al. Histopatološke značajke očne lišmanioze u pasa. J Comp Pathol. 2008;138:32–9.