Detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal que viven en la región mediterránea
Extractos de un estudio de Maria‑Dolores Tabar, Javier Tabar, Carolina Naranjo, Laura Altet y Xavier Roura de 2022
https://doi.org/10.1186/s13071-022-05205-x
traducido y abreviado por Sven Jan Arndt
Introducción
La detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal que viven en la región mediterránea es de gran importancia para la salud y el bienestar de los animales. Mediante exámenes y análisis cuidadosos, se pueden identificar posibles infecciones y se pueden tomar medidas adecuadas para contener la propagación de enfermedades.
No se debe subestimar el papel de los vectores, como las garrapatas o las pulgas, en la transmisión de patógenos a los perros. Estos pequeños parásitos pueden transmitir diversas enfermedades peligrosas como la enfermedad de Lyme, la ehrlichiosis o la leishmaniasis. Por tanto, es importante desarrollar métodos de detección específicos para identificar estos patógenos en perros con rotura del ligamento cruzado craneal en la región mediterránea.
El diagnóstico eficaz requiere una combinación de diferentes técnicas y pruebas. Entre ellos se incluyen, por ejemplo, pruebas serológicas, exámenes moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) o exámenes clínicos para detectar síntomas y signos de una infección. Este enfoque integral permite realizar un diagnóstico preciso e iniciar el tratamiento adecuado.
La detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal en la región mediterránea requiere una estrecha colaboración entre veterinarios, laboratorios e instituciones de investigación. Sólo mediante esfuerzos conjuntos podremos profundizar nuestro conocimiento sobre estas enfermedades, desarrollar medidas preventivas y mejorar la salud canina.
En general, la detección de patógenos transmitidos por vectores en perros con rotura del ligamento cruzado craneal en la región mediterránea sería un paso importante para contener la propagación de infecciones y garantizar el bienestar de los animales.
fondo
La rotura del ligamento cruzado craneal ( CCLR ) es una causa común de cojera de las extremidades pélvicas en perros, debido con mayor frecuencia a un proceso degenerativo que resulta en la rotura del ligamento. Se han descrito varios factores de riesgo, como la edad, la raza, el sexo, el estado de esterilización y el peso [1,2]. se cree que la CCLR tiene un origen multifactorial que involucra la genética, la anatomía y la inflamación crónica de las articulaciones, lo que eventualmente conduce a la ruptura de ligamentos y la osteoartritis [3, 4].
Se ha sugerido que mecanismos inmunopatológicos pueden estar involucrados en el desarrollo de lesiones degenerativas del LCC [5] y, además, la sinovitis linfoplasmocítica es un hallazgo común en perros con CCLR [6]. Por tanto, se han propuesto dos hipótesis sobre el papel de la sinovitis crónica en el desarrollo del daño de las fibras del ligamento cruzado y, en consecuencia, del CCLR. La primera hipótesis es que la sinovitis es un evento casi primario que conduce a la destrucción progresiva de las fibras ligamentosas [7].
La segunda razón es que varias publicaciones previas inherentes informaron una mayor carga bacteriana de la membrana sinovial en biopsias de articulaciones de rodilla inflamadas de perros con CCLR en comparación con articulaciones de rodilla sanas, lo que sugiere que las bacterias ambientales pueden desencadenar una sinovitis crónica persistente [8, 9]. Otros tipos de patógenos, como Otros patógenos, como los patógenos transmitidos por vectores (VBP), pueden causar enfermedades articulares agudas y crónicas en perros, pero su papel en CCLR no se ha investigado a fondo [10-14].
En un estudio reciente en Brasil, se informó que el 91,3% de 46 perros con leishmaniasis tenían anomalías articulares detectadas en el examen físico, radiografía y/o tomografía computarizada, pero CCLR no estaba en la lista de las descritas. Anomalías articulares incluidas [14 ]. Otras VBP como Ehrlichiacanis, Anaplasma phagocytophilum, Rickettsiarickettsii, Borrelia burgdorferi, Babesia canis, Bartonellavinsonii subsp. berkhoffii y filariae también se han asociado con enfermedades de las articulaciones como: B. Poliartritis, en perros [4,10, 15-24].
El objetivo de este estudio es detectar múltiples VBP en perros con CCLR, determinar si existe una relación entre la presencia de VBP y CCLR y determinar la presencia de un patrón inflamatorio específico en la membrana sinovial de perros con CCLR y VBP.
Métodos
Este fue un estudio prospectivo que involucró a 46 perros presentados para tratamiento quirúrgico de CCLR y 16 perros de control sacrificados debido a afecciones no relacionadas con las articulaciones. Las muestras recolectadas incluyeron sangre, líquido sinovial y una biopsia de la membrana sinovial.
Las pruebas de patógenos incluyeron serología para Leishmania infantum (ELISA cuantitativa), Ehrlichiacanis/ewingii, Borrelia burgdorferi, Anaplasma phagocytophilum/platys y Dirofilaria immitis (prueba 4DX IDEXX), así como PCR para L. infantum, Ehrlichia/Anaplasma spp, Bartonella spp., piroplasmas. (Babesia spp. y Theileria spp.) y filarias (D. immitis, Dirofilaria repens, Acanthocheilonema dracunculoides, Acanthocheilonema reconditum y Cercopithifilariaspp.) en muestras de sangre completa (EB) y líquido sinovial (SF) con EDTA. Además, se realizó citología del SF y evaluación histopatológica de la membrana sinovial.
Resultados
El estudio incluyó 62 perros, 46 con CCLR y 16 perros de control. Veinticinco perras (17 intactas y ocho castradas) y 21 perros machos (15 intactas y seis castradas) de edades comprendidas entre 6 meses y 11 años se vieron afectados por CCLR. Había 16 razas diferentes, siendo la más común los perros mestizos (n = 18). En el grupo de control había ocho perras (cuatro intactas y cuatro castradas) y ocho perros machos (seis intactas y dos castrados) de 4 a 17 años y 10 razas diferentes (archivo adicional 1: Tabla S1).
Las razones para la eutanasia incluyeron neoplasia (cinco), insuficiencia renal crónica (dos), dilatación-vólvulo gástrico (uno), hiperadrenocorticismo pituitario (uno), hernia discal (dos), obstrucción uretral (uno), insuficiencia cardíaca (dos), epilepsia refractaria. (uno) e insuficiencia hepática aguda (uno).
Ninguno de los perros incluidos en este estudio tenía antecedentes clínicos, signos clínicos o anomalías clínico-patológicas sugestivas de infección por VBP. La prevalencia de VBP en el grupo CCLR fue del 19,6% (9/46). Leishmania infantum se detectó en seis perros, tres de los cuales fueron seropositivos, uno fue positivo para SF-PCR y dos fueron seropositivos y positivos para SF-PCR. Ehrlichia spp. Se detectaron tres perros, dos de los cuales eran seropositivos y uno seropositivo y PCR en sangre positivo (E. canis).
Uno de estos perros estaba infectado con L. infantum (SF-PCR positivo) y Ehrlichia spp. coinfectado (seropositivo). Finalmente, se detectó ADN de Theileriaequi en la muestra SF de un perro (archivo adicional 2: Tabla S2). En el grupo control, la prevalencia de VBP en perros fue del 18,8% (3/16). Los tres perros dieron positivo para L. infantum, uno seropositivo, uno positivo para PCR en sangre y uno seropositivo y ambos positivos para PCR en sangre y SF (archivo adicional 2: Tabla S2). No se detectaron VBP mediante microscopía óptica en un frotis de SF de ninguno de los perros incluidos en este estudio, y la prevalencia general de VBP no fue estadísticamente diferente entre los perros con CCLR y los perros de control [odds ratio (OR) = 0,949, 95% de confianza intervalo (IC) 0,22-4,05, P = 0,629].
La CCLR unilateral se encontró en 29 perros (cinco de ellos con VBP), mientras que la CCLR ocurrió bilateralmente en 17 perros (cuatro de ellos con VBP), lo que significa que la presencia de CCLR bilateral no fue estadísticamente más común en perros con VBP (OR = 0,677). , IC del 95%: 0,15-2,97, P = 0,439). El examen histopatológico de las biopsias de la membrana sinovial reveló sinovitis con diversos patrones inflamatorios, incluidos linfoplasmocítico (17), neutrofílico (uno), granulomatoso (uno) y linfoplasmocítico y granulomatoso mixto (dos) en el 45,6% (21/46) de los perros con CCLR); y en el 43,7% (7/16) de los perros control, todos los cuales tenían infiltración linfoplasmocítica.
La presencia de sinovitis no fue estadísticamente más común en perros con CCLR en comparación con los perros de control (χ2 = 0,017, gl = 1, P = 0,895) o en perros con o sin VBP (χ2 = 0,141, gl = 1, P = 0,708). . Además, no se encontró ningún patrón inflamatorio diferente o específico en perros con VBP, independientemente de si tenían CCLR o eran perros de control (archivo adicional 2: Tabla S2). Al revisar los resultados de perros VBP positivos con CCLR, dos de tres perros con PCR positiva para L. infantum, pero sin antecedentes clínicos ni diagnóstico de infección por Leishmania, desarrolló signos clínicos sugestivos de leishmaniasis manifiesta entre 9 y 12 meses después de la cirugía CCLR (archivo adicional 2: Tabla S2).
discusión
Este estudio no logró demostrar un papel de VBP en CCLR ni la presencia de un patrón específico de inflamación articular en perros VBP positivos, aunque varias enfermedades transmitidas por vectores se han asociado con daño articular en perros [4, 10, 14, 16 - 22, 24] y algunas de ellas, especialmente la leishmaniasis, se consideran endémicas en la zona donde se realizó el presente estudio [28].
Probablemente se necesitarían estudios de casos y controles más amplios para aclarar el papel de varios organismos transmitidos por vectores como causa o cofactor en el desarrollo de CCLR. En la leishmaniasis canina, se ha informado una incidencia de problemas ortopédicos que oscila entre el 44,8% y el 91,3% cuando se combinaron el examen ortopédico y las imágenes (radiología y/o tomografía computarizada) para detectar anomalías articulares [14, 29]. Las anomalías observadas en el examen ortopédico incluyen rigidez de las articulaciones, cojera, hinchazón de los tejidos blandos, dolor o crepitación de las articulaciones y discapacidad funcional.
Los perros con CCLR pueden tener una o más de estas anomalías ortopédicas descritas, pero en estudios previos no hubo información específica sobre la prevalencia de CCLR en perros que padecen leishmaniasis. Teóricamente, la cojera en la leishmaniasis podría ser causada por poliartritis con afectación ósea o muscular adicional, generalmente secundaria a una inflamación asociada con el depósito de complejos inmunes en la articulación debido a una reacción de hipersensibilidad tipo III [4, 12, 30].
Sin embargo, también puede ocurrir una infección articular primaria, y los parásitos se han identificado en los macrófagos mediante examen citológico del líquido sinovial y mediante examen histológico de las membranas sinoviales [31, 32]. Así, los perros infectados pueden presentar monoartritis, oligoartritis o poliartritis [18] y, según algunos informes, la articulación de la rodilla puede verse afectada en casi el 80% de los casos [14]. En este estudio, L. infantum fue la VBP más común detectada en perros con CCLR, aunque su prevalencia no fue significativamente diferente de la de los perros de control, lo que sugiere que la infección por Leishmania no desempeña un papel en la patogénesis de CCLR.
Una posible explicación para la detección en ambos grupos de perros podría ser la alta prevalencia de infección subclínica en una zona endémica de leishmaniasis [28, 33].
Anteriormente se informó una asociación entre poliartritis y ehrlichiosis; sin embargo, no hubo evidencia clara de esto y no se excluyeron otras posibles coinfecciones, por lo que la asociación fue controvertida [10, 15-17]. En el presente estudio, se detectaron anticuerpos o ADN de Ehrlichia en tres perros con CCLR. Sin embargo, no se pudo confirmar la infección en los dos únicos perros seropositivos, lo que puede deberse simplemente a exposición o infección previa. El tercer perro, que era seropositivo y positivo en PCR para E. canis, no tenía otros síntomas clínicos ni anomalías de laboratorio que sugirieran ehrlichiosis manifiesta o subclínica antes o después de la cirugía CCLR.
Esto podría indicar que el perro se encontraba en una etapa aguda de la enfermedad y se recuperó por sí solo, o que se encontraba en una etapa subclínica. Es probable que ambos escenarios excluyan un vínculo entre CCLR y la infección por Ehrlichia. Theileria equi es uno de los piroplasmas equinos enzoóticos en España, y casi la mitad de los caballos tienen anticuerpos o parasitemia circulante [34].
Este parásito se ha detectado ocasionalmente en perros, pero se desconoce su importancia epidemiológica y clínica [35]. Todo esto y el hecho de que el perro en este estudio con T. equi en SF no tuvo otras anomalías clínico-patológicas durante el período de estudio puede indicar que este patógeno era oportunista y no tenía importancia clínica para CCLR.
Aunque Bartonella, A. phagocytophilum, B. burgdorferi, Filariae u otros piroplasmas como Babesia se han asociado con poliartritis canina aguda o crónica [10, 13, 17, 19-22, 36], ningún perro en este estudio dio positivo para ninguna de estos patógenos. Estos resultados pueden ser consistentes con la prevalencia geográfica local de estos VBP encontrada en estudios previos en el área examinada en este estudio [16, 27, 34, 37].
Sin embargo, cabe señalar que la sensibilidad limitada de las técnicas utilizadas y las limitaciones asociadas con las muestras tomadas para el estudio también pueden haber contribuido a la imposibilidad de detectar estos organismos. La artritis linfoplasmocítica fue el hallazgo histopatológico más común en este estudio, tanto en perros con y sin CCLR. Esto es consistente con publicaciones previas en las que la sinovitis linfoplasmocítica se describió comúnmente en perros con CCLR [6], pero también se detectó en muestras postmortem de perros sin CCLR [7].
Por otro lado, la artritis inmunomediada reactiva es predominantemente neutrofílica debido al depósito de complejos inmunes desarrollados como resultado de la infección por VBP [4, 11, 12, 18, 29]. Este hecho refuerza la idea de que VBP no juega ningún papel en la patogénesis de CCLR, junto con el hecho de que ni el patrón inflamatorio ni la frecuencia de sinovitis fueron estadísticamente diferentes entre perros con o sin CCLR o entre perros con o sin VBP en este estudio.
Aunque no es estadísticamente significativo, tres perros con CCLR en este estudio mostraron sinovitis granulomatosa, un tipo de inflamación que también se observa en varios tejidos de pacientes con leishmaniasis [33, 38], pero solo uno de ellos fue positivo para leishmaniasis. Aunque la inflamación granulomatosa generalmente se asocia con la presencia de Leishmania en el tejido [12, 13], no se detectaron amastigotes en este perro seropositivo y LeishmaniaPCR positivo con sinovitis granulomatosa.
La causa de la inflamación granulomatosa en los otros dos perros aún no está clara. Por lo tanto, en el presente estudio no se pudo excluir definitivamente un posible papel de estos VBP en la patogénesis de la sinovitis y quizás también en la CCLR en algunos de estos perros, aunque este estudio tiene algunas limitaciones. El pequeño número de perros incluidos, debido a las dificultades para reclutar casos debido a los estrictos criterios de inclusión y al hecho de que se trata de un estudio prospectivo con un grupo control, hace que los resultados estadísticos deban tomarse con cautela.
Además, solo se incluyeron perros que recibieron tratamiento quirúrgico para CCLR, por lo que se excluyeron los perros que inicialmente fueron diagnosticados con VBP y CCLR y finalmente no se sometieron a cirugía. Otra limitación fue la variedad de enfermedades que llevaron a la eutanasia de los perros de control y el hecho de que no se evaluaron las superficies de las articulaciones, sobre todo porque la población de control tenía una edad promedio más alta.
Sin embargo, se evaluó exhaustivamente el historial médico para excluir infecciones previas por ÖVPP o enfermedades que pudieran afectar las articulaciones. Además, los perros de control fueron examinados durante el mismo período de tiempo y en la misma área que los perros CCLR, por lo que la probabilidad de detectar VBP no estuvo tan influenciada. La última limitación se refería a la determinación de la presencia de VBP. En este estudio utilizamos serología, microscopía en citología de SF y biopsia de membrana sinovial, así como PCR en sangre y SF para maximizar la probabilidad de detección de VBP.
Sin embargo, las serologías positivas no demostraron la causalidad de las anomalías encontradas en la articulación. Además, no fue posible realizar serología para todos los patógenos buscados, ni se pudo realizar inmunohistoquímica y/o PCR en la biopsia para aumentar la probabilidad de detectar VBP seleccionadas.
Conclusiones
Este estudio no logró demostrar un papel para diferentes VBP en la patogénesis de CCLR en perros ni la presencia o patrón diferente de inflamación articular en perros con patógenos positivos. Sin embargo, para superar las limitaciones de este estudio, es posible que se requieran más estudios para aclarar la posible asociación entre VBP y CCLR en perros.
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